气态和液态甲醛对大鼠骨髓细胞遗传毒性的研究

摘要

甲醛是一种遗传毒物，流行病学研究表明甲醛可能具有诱导白血病的作用，然而甲醛诱导白血病的机制目前还不清楚.以不同浓度液态和气态甲醛对大鼠骨髓细胞进行染毒，采用KCl-SDS法检测了骨髓细胞DNA-蛋白质交联程度，并采用单细胞凝胶电泳技术(彗星实验)检测了骨髓细胞DNA链断裂程度.研究结果表明：与对照组相比，低浓度甲醛(液态甲醛浓度为：5μmol·L-1和25μmol·L-1；气态甲醛浓度为：0.5mg·m-3和1.0mg·m-3)可以引起DNA断裂水平显著增高(p＜0.01)；而高浓度甲醛(液态甲醛浓度为：125μmol·L-1和625μmol·L-1；气态甲醛浓度为：3.0mg·m-3)则可以引起DNA-蛋白质交联水平显著增高(p＜0.01；p＜0.05).研究结果提示：甲醛染毒可以导致大鼠骨髓细胞DNA的损伤，提示甲醛诱导白血病具有高度的可能性.

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1.综述

1.1甲醛与人类日常生活

1.2甲醛在生物体内的主要代谢途径

1.3甲醛的遗传毒性

1.4甲醛与DNA-蛋白质交联(DNA-protein crosslinks，DPC)

1.4.1甲醛导致的DPC

1.4.2 DPC与KCl-SDS沉淀法

1.4.3甲醛与单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis assay,SCGE)

1.5甲醛可能导致白血病

2.材料与方法

2.1实验动物

2.2主要化学试剂

2.3主要实验仪器

2.4主要实验溶液的配制

2.4.1 PBS缓冲液的配制

2.4.2 KCl-SDS实验相关试剂

2.5实验步骤

2.5.1骨髓细胞悬液制备及液态气态染毒处理

2.5.2大鼠气态染毒处理

2.5.3 KCl-SDS沉淀法测定甲醛致大鼠骨髓细胞DPC效应

2.5.4彗星实验对骨髓细胞DNA断裂和DPC的检测

2.5.5试验数据的统计分析

3.结果

3.1 DNA浓度标准曲线

3.2液态甲醛致大鼠骨髓细胞DPC效应

3.2气态甲醛致大鼠骨髓细胞DPC效应

3.3不同浓度液态甲醛致大鼠骨髓细胞DPC和DNA损伤的检测

3.4不同浓度气态甲醛致大鼠骨髓细胞DPC和DNA损伤的检测

4.讨 论

4.1 DPC的生化特性与形成机理

4.2单细胞凝胶电泳实验(SCGE)

4.3甲醛致大鼠骨髓细胞DNA损伤和DPC形成的机制

4.4骨髓细胞的功能和白血病

4.5甲醛与白血病

5.结 论

参考文献

研究生在读期间已发表的科研论文

致 谢

附：已发表论文一篇