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人巨细胞病毒(HCMV)pp65基因的克隆、原核表达及抗原性研究

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第一章前言

1.1人巨细胞病毒概述

1.2 HCMV pp65研究现状

1.3本研究的目的与意义

第二章重组表达质粒pET32a-pp65的构建

2.1实验材料

2.2实验方法

2.3实验结果

2.4讨论

第三章pET32a-pp65在大肠杆菌中的表达、纯化及抗原性分析

3.1实验材料

3.2实验方法

3.3实验结果

3.4讨论

第四章全文总结

参考文献

附录 扩增基因比对结果

致谢

作者简历

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摘要

本研究进行了人巨细胞病毒pp65基因的克隆及pET32-pp65重组表达质粒的构建(1)利用蛋白酶K法提取HCMVDNA。(2)设计引物、PCR扩增pp65基因目的片段。(3)BamHⅠ和XhoⅠ内切酶双酶切目的片段和质粒pET32a(+)。并将pp65基因目的片段连接到pET32a(+)上,构建成能融合表达pp65的重组质粒pET32-pp65。(4)提取重组质粒pET32-pp65,以BamHⅠ和XhoⅠ双酶切方法和PCR方法鉴定重组质粒,说明重组质粒构建成功。本研究实现了pp65基因的融合表达,获得了具有免疫活性的表达产物,为进一步制备或组装高特异性和敏感性的HCMV基因工程抗原试剂盒奠定了基础。

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