红汁乳菇生物学特性与半人工栽培技术研究

摘要

本项研究通过野外生态因子调查，菌根、菌丝、孢子、子实体等形态显微观察、DNA中内部转录间隔区(ITS)及大亚基(LSU)序列分析的探索，较系统地研究了其生物学特性，成功栽培出了红汁乳菇子实体。设计验证了用于扩展红汁乳菇子实体和菌根等DNA的特异引物，对红汁乳菇适生土壤化学营养和物理结构进行了测定分析，为红汁乳菇种植园的建立与管理提供了依据。首次报道红汁乳菇-马尾松菌根的菌丝套网格结构特征，确认红汁乳菇菌丝细胞联接处无锁状联合；对红汁乳菇秋季产菇期间气象条件的研究表明，较大幅度的降温和降雨对诱发红汁乳菇子实体形成是必需的。特别是对红汁乳菇栽培区水分管理的研究，为保障红汁乳菇干旱年份高产稳产提供了范例。其主要研究结果如下： 1.对菌根内部结构测定显示，菌丝直径、菌丝套厚度、哈蒂氏网厚度、菌根直径的比例为1：4.7：31.9：138.4。首次报道了菌丝套的网格结构。菌丝套网格中网孔大多呈菱形，少数为不规则四边形。测量结果表明，网孔长度为宽度的2.85倍，网脊宽度为网孔宽度的16.7﹪。确证红汁乳菇菌丝细胞与细胞连接处没有锁状联合。 2.对多种乳菇属真菌的ITS序列和LSU序列系统发育关系的研究表明，红汁乳菇与L.akahatsu及L.sp聚成一群，但又彼此独立成枝，说明它们是亲缘关系较密切的独立的种。 无论是ITS序列还是LSU序列构造的发育树均证明L.hatsutake各菌株之间存在一定的变异。从ITS序列看，二者主要是在ITS2区的某些位点上存在碱基缺失、替代、颠换现象，有差异的碱基达3-15个。 3.设计的红汁乳菇特异引物对Primerhat1F(AAAGGCCTCCAAAGTCCAAG)和PrimerhatlR(TCGTACCAGGTTTCCGTAGG)在设定条件下扩增多种真菌DNAITS序列的电泳显带结果表明，该引物对仅能扩增红汁乳菇子实体及红汁乳菇与马尾松形成的菌根以及松乳菇的ITS序列，不能扩增其它种及马尾松的相应区段的序列。说明该对引物可用于红汁乳菇及其菌根之DNA的种类识别。 4.对湖南红汁乳菇-马尾松高产林分土壤物理化学性质研究结果表明，红汁乳菇适生土壤包括红壤、黄壤和紫色土。主要由板岩、石灰岩、紫色砂岩、第四纪红色粘土母质等发育而成。pH值范围4.6-6.1，平均5.0。 红汁乳菇适生土壤石砾含量可达18.7-47.11﹪，土壤容重为1.2-1.57，板岩的非毛管孔隙占总孔隙之比为29.54-36.69﹪，与其它母岩发育的土壤相比，土壤通气性、透水性和持水能力的协调性较好。因此，对于红汁乳菇栽培而言，板岩发育的土壤是较理想的。 5.对红汁乳菇产菇季节气象条件的研究表明，开始产菇前，有大幅度的降温和较多降雨，降温幅度达10-12.3℃。在此期间，最高气温一般在20°C以下，最低气温9.5-15.9℃。而地温一般为11-19℃。降雨呈间歇性交叠型，平均每天6.5-7.5mm。气温12-16°C，相对湿度80﹪是出菇的良好气象条件。 6.红汁乳菇菌丝可以在多种培养基上生长。在20-23℃条件下，6-8天长出菌丝。菌丝初期呈白色，后变浅黄、浅红。将红汁乳菇液体培养的菌丝接种到马尾松无菌苗上，形成了红汁乳菇菌根苗，继续栽培到紫色砂岩发育的荒地上，成功培养出了红汁乳菇子实体。 7.首次报道，连续较长时间的干旱(60天)，可以导致红汁乳菇菌根死亡。表层土壤内(0-30cm)，红汁乳菇菌根死亡率可达85.8-92.76﹪。因此，适时采取抗旱措施，对于确保菌根存活与正常发育是非常必要的。 红汁乳菇栽培试验地灌水试验表明，干旱季节进行浇灌，可使产量提高6倍。说明人工促进红汁乳菇产量增加的措施是行之有效的。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

独创性声明及关于论文使用授权的说明

第一章绪 论

第二章红汁乳菇生物学特性研究

第三章红汁乳菇的遗传多样性

第四章红汁乳菇适生区土壤研究

第五章红汁乳菇子实体发生与气象条件的关系

第六章红汁乳菇菌种分离培养与出菇试验

讨论

参考文献Reference

图版1-7

图版8-12

致谢

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