银耳交配型因子A测定及银耳接合激素初步研究

摘要

该研究以8个银耳菌株为材料,研究交配型因子A在不同菌株中的分布,结果表明此8个菌株中交配型因子A只有两个等位基因,记为A、a.A和a型银耳孢子分别能产生一种激素,此激素互相诱导,产生萌发管并接合,称之为接合激素或交配信息素（Mating hormone）.银耳孢子产接合激素是由交配型因子A决定的,同时其活性受培养条件的影响.碳源、氮源单因子试验表明：蔗糖和（NH<,4>）<,2>SO<,4>为较优碳源和氮源.L<,9>(3<,4>)正交试验表明：蔗糖浓度为20g/L、（NH<,4>）<,2>SO<,4>浓度为12mmol/L、温度23℃、pH6.5,银耳孢子产接合激素活性最高,在优化培养条件下,培养4天,接合激素活性达到峰值.银耳接合激素对热、pH、盐离子、蛋白酶都不稳定,高温,高pH缓冲液、高浓度的盐离子及蛋白酶都能使接合激素性降低,甚至活性完全丧失,这使得接合激素分离纯化方法的选择受到限制.吸附剂如活性碳、聚酰胺、D4020、AB-8对银耳接合激素均无吸附活性.离子交换剂D61对银耳接合激素有交换作用,但其洗脱条件本身对接合激素活性有影响,所以不能使用.冷冻干燥法浓缩发酵液效果较好.

目录

文摘

英文文摘

前 言

材料与方法

1材料

2方法

2.1银耳交配型因子A分析

2.2银耳接合激素产生条件研究

2.3银耳接合激素性质

2.4银耳接合激素初步分离纯化

2.5银耳孢子、萌发管和菌丝显微及荧光观察

结果与分析

1银耳交配型因子A在不同菌株中的分布

1.1 TrH菌株单孢分离物配对结果

1.2 Tr63菌株单孢分离物配对结果

1.3 Tr85菌株单孢分离物配对结果

1.4 TrS菌株单孢分离物配对结果

1.5 Tr01菌株单孢分离物配对结果

1.6 TrJ1菌株单孢分离物配对结果

1.7 TrJ2菌株单孢分离物配对结果

1.8 TrJ3菌株单孢分离物配对结果

1.9银耳交配型因子A在不同菌株中的分布

2银耳接合激素产生条件研究

2.1银耳接合激素生物活性测定方法

2.2发酵基础培养基中银耳孢子生长曲线、接合激素活性曲线

2.3碳源试验

2.4氮源试验

2.5 C/N试验

2.6碳源、氮源、pH、温度正交试验

3银耳接合激素性质

3.1银耳接合激素对热的稳定性

3.3银耳接合激素对盐离子的稳定性

3.4银耳接合激素对蛋白酶的稳定性

4银耳接合激素初步分离纯化

4.1发酵液旋转蒸发浓缩

4.2吸附柱色谱

4.3离子交换色谱

4.4冷冻干燥浓缩

4.5浓缩液凝胶过滤

5银耳孢子、萌发管和菌丝的显微及荧光观察

5.1显微观察

5.2荧光观察

结论与讨论

1结论

2讨论

参考文献

致谢