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银杏叶苯丙氨酸解氨酶特性及其对叶黄酮含量调控的研究

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缩略词

1、前言

1.1研究目的及意义

1.2课题的提出

1.3PAL研究进展(文献综述)

1.3.1 PAL分布与定位

1.3.2 PAL酶学性质

1.3.3 PAL生理意义

1.3.4 PAL调控方式

1.3.5 调控水平

1.3.6 调控机理

1.3.7 PAL酶在果树上的研究现状、展望及应用前景

1.3.8研究内容一览

2、材料与方法

2.1材料

2.2试验设计、取样及预处理

2.3试验方法

2.3.1分离纯化条件的优化

2.3.2分离纯化(欧阳光察等,1985;孟延发和辛嘉英,1990)

2.3.3银杏叶PAL基本性质(欧阳光察等,1985;孟延发和辛嘉英,1990;汪家政和范明,2001)

2.3.4金属离子对PAL活性的影响

2.3.5体外银杏叶PAL影响因子

2.3.6黄酮含量测定(程水源,2001)

2.3.7 PAL酶活性测定

2.3.8蛋白质的测定

2.4数据处理

3、结果与分析

3.1盐析条件的优化

3.1.1多次离心分段盐析

3.1.2两次离心分组盐析Ⅰ

3.1.3两次离心分组盐析Ⅱ

3.2离子交换条件的优化

3.3银杏叶PAL的分离纯化及基本性质

3.3.1银杏叶PAL的分离纯化

3.3.2最适pH及pH耐受性

3.3.3最适温度及温度耐受性

3.3.4最适底物浓度

3.3.5贮存性质

3.3.6动力学曲线与Km

3.4金属离子对酶活力影响

3.4.1重金属对酶活力影响

3.4.2活性中心常见金属离子对酶活力影响

3.4.3金属螯合剂EDTA及酶抑制剂KBH4对酶活性影响

3.4.4 Zn2+盐不同形态对酶活力影响

3.5体外银杏叶PAL影响因子的研究

3.5.1低温条件下,红光和白光对PAL活性变化的影响

3.5.2室温条件下,红光和白光对PAL活性变化的影响

3.5.3机械损伤诱导的PAL活性变化

3.5.4生长调节剂对酶活性影响

3.5.5底物、末端产物对酶活性影响

3.6田间试验酶活性及黄酮含量变化的研究

3.6.1盆栽金属离子处理试验酶活性及黄酮含量的变化

3.6.2各因子的影响动态分析

3.7叶用园田间试验酶活性及黄酮含量变化的研究

3.7.1叶用园田间试验酶活性及黄酮含量变化

3.7.2各因子的影响动态分析

4、讨论

4.1金属离子对酶活性及黄酮含量的影响

4.2离体叶片PAL酶活性影响因子

4.3生长调节剂对酶活性及黄酮含量的调控

参考文献

致谢

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摘要

以银杏叶为试材,研究叶黄酮生物合成关键酶---苯丙氨酸解氨酶(PAL)的特性及主要影响因子,并开展了提高银杏叶黄酮含量试验.

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