荆半夏不同品系的组织培养技术研究

摘要

半夏Pinelliaternate(Thunb.)Breit为天南星科多年生草本植物，其干燥块茎半夏是名贵中药材。由于半夏野生环境遭到破坏，以及人们的乱采乱挖，其野生产量已供不应求；人工栽培半夏又由于其繁育系数低，品种良莠不齐，病毒侵染等原因导致其产量下降、品质退化及经济效益低下。 本文以不同品系的荆半夏(TY，XY，KY)为试验材料，在MS基本培养基中添加不同浓度的NAA、2，4-D、KT等，分别筛选启动培养基(正交试验设计)，愈伤分化，壮苗最佳培养基。同时选用栽培基质40％的熟土加40％的蛭石和20％珍珠岩对组培苗移栽成活率以及组培半夏总生物碱，鸟苷含量进行研究。具体的试验结论如下： (1)不同的取材部位的愈伤组织诱导率各不相同，以幼嫩叶柄的诱导率最高，其次是叶片： (2)荆半夏不同品系所需要的最佳启动培养基不同。TY品系：NAA0.2mg/L+2.4-D1.0mg/L+KT0.5mg/L，诱导率96.0％；XY品系：NAA0.5mg/L+2，4-D1.0mg/L+KT0.2mg/L，诱导率达到100％；KY品系：NAA0.2mg/L+2，4-D0.5mg/L+KT1.0mg/L，诱导率为90.0％。其中2，4-D在愈伤组织的诱导过程中起到重要作用； (3)荆半夏不同品系愈伤诱导分化所需培养基存在差异。TY、XY品系：MS+2，4-D0.5mg/L+KT0.5mg/L；KY品系：MS+NAA0.5mg/L+KT0.5mg/L。Xy、TY品系荆半夏愈伤的分化能力要强于KY品系。愈伤组织以疏松，颗粒状，乳白色或浅绿色分化率高。 (4)不同品系的半夏生根对于基本培养基内的盐浓度的需求存在差异。1/2MS+NAA0.1mg/L可为不同品系荆半夏丛生芽通用生根培养基，但是TY品系丛生芽在MS5号培养基(MS+NAA0.1mg/L)中可获最好的生根壮苗效果。培养基1/2MS+NAA0.1mg/L+0.8％AC和1/2MS+NAA0.5mg/L+0.8％AC适合促进小块茎增长。 (5)以40％的熟土+40％的蛭石+20％珍珠岩的配方为组培种茎培养人工基质，移栽成活率为92％； (6)荆半夏组培种茎总生物碱含量以TY品系含量最高为0.0125％，其次为XY品系，KY品系；鸟苷含量以XY品系最高为0.0122％，其次为TY品系，KY品系。组培种茎的总生物碱和鸟苷含量均低于大田栽培品。 通过试验表明应用恰当的组织培养技术可以在短时间内获得大量的半夏植株。

目录

文摘

英文文摘

声明

1前言

1.1半夏本草考证

1.2半夏种质资源及其面临的危机

1.2.1半夏的种质资源

1.2.2我国半夏种质资源面临的危机

1.3药用植物组织培养的研究概况

1.4半夏组织培养的研究

1.4.1植物激素对愈伤组织诱导、增殖分化的影响

1.4.2半夏试管小块茎形成和一次成苗的研究

1.4.3培养基中其他添加物对组织培养的影响

1.4.4温度、光照、湿度对再生苗形成的影响

1.4.5半夏再生苗移栽的研究

1.5半夏遗传多样性及其品质的研究

1.6本研究的目的意义及主要内容

2材料与方法

2.1试验材料及来源

2.1.1外植体灭菌及最佳外植体材料的选取

2.1.2启动培养试材

2.1.3愈伤分化

2.1.4壮苗

2.1.5组培种茎移栽

2.1.6组培种茎主要成分含量测定

2.2药品试剂

2.3主要仪器

2.3.1玻璃器皿

2.3.2 仪器

2.3.3其他

2.4试验方法与步骤

2.4.1制备母液

2.4.2培养基配置

2.4.3荆半夏不同品系的组织培养

2.4.4荆半夏组培种茎主要成分含量测定

3结果与分析

3.1不同品系荆半夏组织培养

3.1.1外植体灭菌试验

3.1.2最佳外植体的筛选

3.1.3三个品系荆半夏启动培养

3.1.4不同品系荆半夏愈伤分化

3.1.5生根壮苗

3.1.6组培荆半夏种茎的移栽

3.2荆半夏组培种茎主要成分含量测定

3.2.1总生物碱含量测定

3.2.2鸟苷含量测定

4.讨论

4.1荆半夏组织培养

4.1.1外植体选择

4.1.2植物激素对三个品系荆半夏器官发生的调控

4.2组织培养荆半夏主要成分

4.3展望

参考文献

致谢

附录