中国甜杮自然脱涩性状早期筛选及其杂交育种研究

摘要

栽培柿（Diospyros kaki Thunb.）品种多，变异丰富，为杂交育种研究提供了丰富的亲本材料。但其倍性高(6x)、雄花资源少，也是其遗传改良的主要障碍。本研究在对中国甜柿育种亲本组合进行分析的基础上，重点对其自然脱涩性状的早期选择进行了研究;此外，利用SCoT技术对部分柿品种的鉴定和遗传关系进行了探讨;以期为中国甜柿遗传改良提供科学依据。主要结果如下:
　　1.应用36条引物对31个柿品种和3个柿近缘种进行SCoT分析。从36条引物中筛选得到17条有多态性、重复性好的引物;34份试材共扩增出154条谱带，平均多态性比率94.16％，每引物可产生8.5条多态性谱带;2种聚类方法均表明来自江西省的种质独自聚为一大组，且组内又按种质的地理分布各自聚类;完全甜柿与非完全甜柿截然分开，且中国甜柿与日本甜柿亦各自聚类。
　　2.统计8份杂交父本的花粉离体萌发率并计算所有杂交组合的坐果率、得胚数及亲和指数，发现供试8份雄性种质花粉离体萌发率在16.8％-64.2％之间;中国原产完全雄株种质花粉的离体萌发率与常见授粉品种‘禅寺丸’和‘西村早生’相当;同一种质在不同年份的花粉离体萌发率差异不明显。坐果率受母本影响更大;坐果率与亲和指数之间无明显相关性;品种的单性结实能力对亲和指数影响较大。
　　3.对不同脱涩类型的品种进行Mast/MAST及RO2位点基因分型，发现Mast/MAST不能用于鉴定中国甜柿的脱涩类型;供试44份柿品种（包括甜涩性状已知的所有中国甜柿类型）、2份柿属植物（君迁子和油柿）和两个杂交F1群体（共117株）中，10份中国甜柿和6份完全雄性种质可检测到RO2标记，说明该标记可能与控制中国甜柿自然脱涩性状相关等位基因连锁;RO2标记在两个杂交F1群体均呈现1∶1比例分离，说明中国甜柿自然脱涩性状受单个显性基因位点控制;完全雄性种质亦可检测到自然脱涩基因标记，可能说明其作为完全甜柿育种亲本的应用潜力。
　　综上所述，进行中国甜柿杂交育种工作最有前景的的杂交组合是‘鄂柿1号’、‘恭城水柿’、‘华柿1号’分别与‘罗田甜柿’和含有RO2标记的完全雄性种质的组合;中国甜柿快速遗传改良体系与日本柿品种选育程序相比，不仅克服了近亲退化的现象，还缩短了育种时间，提高了育种效率。

目录

声明

摘要

缩略语表

1 课题的提出和前人研究进展

1．1 课题的提出

1．2 前人研究进展

1．2．1 柿属植物的种类及其分布

1．2．2 栽培柿品种资源

1．2．3 栽培柿品种遗传育种研究进展

1．2．4 柿属植物DNA分子标记研究进展

1．3 本研究的目的和内容

1．3．1 研究目的

1．3．2 研究内容

2 基于SCoT标记的部分栽培柿品种亲缘关系研究

2．1 前言

2．2 材料和方法

2．2．1 材料

2．2．2 DNA提取

2．2．3 DNA质量检测

2．2．4 SCoT-PCR扩增

2．2．5 PCR产物检测

2．2．6 数据统计和聚类分析

2．3 结果与分析

2．3．1 SCoT标记分析

2．3．2 UPGMA聚类分析

2．3．3 主坐标分析

2．4 讨论

2．4．1 SCoT标记及多态性

2．4．2 SCoT标记的聚类分析

3 中国甜柿杂交育种中亲和指数的研究

3．1 前言

3．2 材料与方法

3．2．1 材料

3．2．2 花粉收集和保存

3．2．3 花粉萌发力检测

3．2．4 人工授粉

3．2．5 幼胚抢救培养

3．2．6 亲和指数

3．3 结果与分析

3．3．1 花粉荫发率结果

3．3．2 人工杂交授粉试验结果

3．4 讨论

4 中国甜柿自然脱涩性状的早期鉴定及RO2标记分离比例研究

4．1 前言

4．2 材料与方法

4．2．1 材料

4．2．2 DNA提取

4．2．3 DNA质量检测

4．2．4 SCAR标记扩增

4．2．5 PCR产物检测

4．2．6 RO2片段回收及纯化

4．2．7 RO2片段克隆

4．2．8 数据分析

4．3 结果与分析

4．3．1 MAST和Mast标记在部分柿品种中扩增

4．3．2 RO2标记在46份柿属植物中扩增及序列比对

4．3．3 RO2标记在两个杂交F1群体中分离

4．4 讨论

5 总讨论

5．1 中国甜柿快速育种体系

5．2 中国原产完全雄性种质的育种学价值

5．3 进一步工作设想

参考文献

附录

作者简历及在学期间所取得的科研成果

致谢