声明
摘要
缩略语表
第一章文献综述
1前言
2脂肪组织的功能
2．1脂肪组织的发育
2．2脂肪细胞生成的基本过程
3脂肪细胞生成的分子调控
3．1间充质千细胞成脂“定型”的分子调控
3．2前脂肪细胞“终末分化”的分子调控
3．3脂肪细胞生成差异转录因子的筛选
3．4组蛋白修饰在脂肪细胞生成中的分子开关作用
4基因转录后修饰：mRNA m6A修饰及对脂肪细胞生成的调控
4．1 m6A的书写、擦除与识别
4．2 m6A修饰的生物学功能
5转录调控与转录后m6A修饰
6锌指蛋白Zfp217
6．1 Zfp217基因的功能研究
6．2 Zfp217的转录调控功能
6．3 Zfp217在mRNA m6A修饰中的作用
7存在的问题与研究的目的意义
第二章Zfp217通过Zfp521调控脂肪细胞“定型”的研究
1前言
2材料与方法
2．1试验材料
2．2主要仪器、试剂和配制
2．3试验方法
3试验结果
3．1过表达Zfp217促进脂肪细胞生成
3．2 siRNA干扰Zfp217抑制脂肪细胞生成
3．3 CRISPR／Cas9介导的Zfp217敲除，抑制了脂肪细胞生成
3．4 Zfp217影响细胞内稳态和脂质代谢
3．5 Zfp217对MEF脂肪细胞生成的影响
3．6 Zfp217促进或抑制关键基因的表达
3．7 Zfp217转录抑制Zfp521的活性
3．8 CoIP验证Zfp217和Ezh2的蛋白互作
3．9激光共聚焦拍照验证Zfp217和Ezh2的细胞共定位
3．10 Zfp217与Ezh2互作调控Zfp521组蛋白甲基化修饰
3．11 Zfp217通过Ezh2调控成脂分化
4讨论
4．1 Zfp217是调控脂肪细胞生成的正调控因子
4．2 Zfp217通过转录调控机制调控脂肪细胞生成
第三章Zfp217通过E4bp4调控前脂肪细胞“终末分化”的研究
1前言
2材料与方法
2．1试验材料
2．2主要仪器、试剂和配制
2．3试验方法
3试验结果
3．1 E4bp4受到Zfp217的转录调控
3．2 E4bp4是脂肪细胞生成的正调控因子
3．3糖皮质激素促进E4bp4的表达
3．4 E4bp4参与糖皮质激素对脂肪细胞生成的调控
3．5 E4bp4促进或抑制成脂关键基因
3．6 E4bp4通过转录抑制Cox2促进脂肪细胞生成
3．7 E4bp4调控成脂关键结构域的鉴定
4讨论
4．1 E4bp4正向调控脂肪细胞生成
4．2 E4bp4响应糖皮质激素信号通路
1前言
2材料与方法
2．1试验材料
2．2主要仪器、试剂和配制
2．3实验方法
3试验结果
3．1 Zfp217参与调节胞内m6A修饰水平
3．2 Zfp217转录激活m6A去甲基化酶FTO的表达
3．3 Zfp217调控m6A修饰下游靶基因的筛选
3．4 Zfp217与YTHDF2蛋白互作，影响FTO去甲基化酶活性
4讨论
4．1 Zfp217参与3T3L1细胞m6A修饰的调控
4．2 Zfp217通过FTO的调控影响脂肪细胞生成
4．3 Zfp217与YTHDF2蛋白互作，调控FTO的活性
第五章讨论和结语
1总体讨论
1．1 Zfp217参与脂肪生成的转录调控网络
1．2 Zfp217衔接转录调控网络和m6A转录后修饰
1．3 Zfp217作为功能蛋白调控m6A修饰
2研究结论
3创新点
4本研究的不足之处
参考文献
附表
附录
致谢
