二恶项类化合物的虫荧光素酶报告基因检测

摘要

该研究的目的是利用二恶英类化学物质的毒理机制,建立一种快速、简例、灵敏、实用的筛选新方法.二恶英类化学物质与该稳定转染细胞株接触可诱导虫荧光素酶剂量依赖性的表达,通过发光检测虫荧光毒酶的含量则可定量二恶英类化学物质的量.研究内容分四部分:一、含二恶英反应元件虫荧光素酶报告基因质粒的构建;二、人肝肿瘤细胞株HepG2的培养及重组质粒的稳定转染;三、稳定转染细胞株检测二恶英类化学物质的研究;四发光法与EROD法检测二恶英的比较.总之,该研究初步建立了一种基于虫荧光毒酶报告基因的二恶英类化学物质检测方法.该法简便、快速、灵敏,适合于大量样本的快速定性筛选和半定量检测,既可独立使用也可用于为色普法检测筛选阳性样本.

目录

第一章绪论

1.二恶英类化学物质的分类、来源及环境行为

1.1二恶英类化学物质的结构及分类

1.2二恶英类化学物质的产生与环境来源

1.3二恶英类化学物质的环境转归与分布行为

2.二恶英类化学物质的毒理性质和毒性机理

2.1二恶英类化学物质的主要毒性性质

2.2二恶英类化学物质毒性的毒性机理

3.二恶英类化学物质的检测进展

3.1二恶英类化学物质的检测的定量方法及特点

3.2二恶英类化学物质的检测方法

参考文献

第二章含二恶英表达元件虫荧光素酶报告基因质粒的构建

1引言

2实验部分

2.1仪器与试剂

2.2实验方法

3结果与讨论

参考文献

第三章细胞的培养及重组质粒转染细胞株

1引言

2实验部分

2.1仪器与试剂

2.2实验方法

3结果与讨论

4结论

参考文献

第四章稳定转染细胞株检测二恶英类化学物质的研究及与EROD法的比较

1引言

2实验部分

2.1仪器与试剂

2.2实验方法

2.3数据的统计分析

3结果与讨论

4结论

参考文献

第五章总结

作者硕士期间完成的论文

致谢