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硒锌铅对细胞端粒和端粒酶的作用及机理研究

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英文文摘

1 绪论

2 硒对人胎肝细胞和肝癌细胞端粒酶和端粒作用的研究

3 锌对人胎肝细胞和肝癌细胞端粒作用的研究

4 铅对人胎肝细胞和肝癌细胞端粒作用的研究

5 灯盏花素拮抗过量硒对人胎肝细胞L-02毒性作用的研究

6 全文总结

致 谢

参考文献

附录1 攻读硕士学位期间发表论文

附录2 主要缩写词表

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摘要

本文以人胎肝细胞L-02和人肝癌细胞SMMC-7721为模型,采用噻唑蓝(MTT)比色法和细胞形态观察法获得作用于细胞的硒和锌的最佳浓度以及铅的浓度,通过端粒重复序列扩增-焦磷酸根酶联发光技术(TRAP-ELIDA)检测端粒酶活性,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达水平,流式荧光原位杂交法(FLOW-FISH)检测端粒长度,并测定了细胞内丙二醛(MDA)含量、巯基含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性和总的超氧化物歧化酶(T-SOD)活性,研究硒、锌和铅对细胞端粒酶活性、端粒长度的作用以及与细胞氧化还原水平的关系。文中还研究了灯盏花素对过量硒造成的人胎肝细胞毒性的拮抗作用。实验结果表明0.5 mmol/L灯盏花素在与L-02细胞作用48 h后对细胞生长的促进作用达到最佳效果,该浓度的灯盏花素可以显著性拮抗5 mmol/L硒对细胞生长的抑制作用,提示灯盏花素通过抗氧化、提高细胞巯基含量及总抗氧化能力,来拮抗过量硒对人正常肝细胞L-02的毒性作用。

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