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目录
研 究 背 景
实验材料及试剂
主要试剂配制
1、DMEM培养基的配制:
2、10×PBS配制:
3、0.25%胰蛋白酶配制:
4、TB培养基的配制:
5、LB培养基的配制:
6、溶液Ⅰ的配制:
实 验 方 法
一、质粒的小量提取:
二、质粒的大量提取:
三、质粒的纯化(Merlin纯化方案,适用于250-1000ml菌液):
四、酶切鉴定:
五、293细胞培养:
六、脂质体转染:
七、G418对人胎肾细胞株最小致死量测定:
八、G418抗性人胎肾细胞株的筛选:
九、Bradford方法测定蛋白质浓度
十、用Western blot的方法鉴定G418抗性人胎肾细胞株:
实 验 结 果
一、 荧光蛋白表达检测
二、G418对人胎肾细胞株最小致死量的测定结果
三、G418筛选人胎肾细胞株的阳性克隆
讨论
参考文献
综述
致谢
华中科技大学;