精索静脉曲张模型大鼠睾丸prokineticin2表达的实验研究

摘要

文章从以下两部分就精索静脉曲张模型大鼠睾丸prokineticin 2表达的实验研究进行了综述。
　　第一部分大鼠睾丸固定剂的选择
　　目的:比较4％多聚甲醛、改良Davidson固定剂及Bouin液三种不同固定剂固定大鼠睾丸后的形态学特点,以找到最为适宜的睾丸形态固定剂。
　　方法:10只SD大鼠的睾丸被剪成两半分别固定于三种不同固定剂,常规脱水、透明、浸蜡、包埋,石蜡切片机连续切片,HE常规染色。
　　结果:固定于4％多聚甲醛中的睾丸有明显缩水,生精小管之间的缩水尤其严重。Bouin液固定的睾丸,亦有不同程度的缩水,主要表现在睾丸组织的中央。改良 Davidson固定剂固定的睾丸无明显缩水,只在生精细胞之间观察到轻微缩水。细胞核在改良Davidson固定剂和Bouin液固定的睾丸中的形态要比4％多聚甲醛中的清晰。
　　结论:相比Bouin液与4％多聚甲醛两种固定剂,改良Davidson固定剂对保存大鼠睾丸的形态更佳。
　　第二部分精索静脉曲张模型大鼠睾丸prokineticin2的表达
　　目的:研究精索静脉曲张对大鼠睾丸组织prokineticin2表达的影响,探讨精索静脉曲张引起不育的病理机制。
　　方法:选用雄性SD大鼠48只,分为假手术组(n=6×3),手术组(n=10×3)。采用左肾静脉缩窄法建立精索静脉曲张动物模型,并于(假)手术后2周、4周及8周分别获取左侧睾丸,采用半定量RT-PCR法检测prokineticin2 mRNA的含量,免疫组织化学法检测prokineticin2蛋白质在睾丸中的定位及含量(半定量分析)。
　　结果:mRNA水平:prokineticin2在精索静脉曲张的大鼠睾丸中表达升高,除4周组以外,与对照组比有显著性差异(P<0.05),4周组同2周组比较显著下降。免疫组织化学显示prokineticin2主要表达于精原细胞,其次是初级精母细胞,定位于细胞核;长形精子细胞、支持细胞、管周肌样细胞及间质血管内皮细胞也有阳性表达;精子及间质细胞中亦有弱表达。半定量分析结果除4周组无显著改变以外同RT-PCR法一致。结论:精索静脉曲张可引起大鼠睾丸prokineticin2表达增加,prokineticin2可能与精索静脉曲张引起睾丸生精功能障碍导致不育的机制有关。

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前 言

第一部分 大鼠睾丸固定剂的选择

材料与方法

结 果

讨 论

参考文献

第二部分 精索静脉曲张模型大鼠睾丸prokineticin 2的表达

一、动物分组及模型构建

二、精索静脉曲张模型大鼠睾丸prokineticin 2 mRNA的表达

三、精索静脉曲张模型大鼠睾丸prokineticin 2 蛋白质的表达

参考文献

综 述

基于动物模型的精索静脉曲张致病机制研究进展

参考文献

小结

附录

致谢