OGD对BBB体外模型中内皮细胞紧密连接蛋白及TEER的影响

摘要

第一部分，目的:为了加深对血脑屏障的认识与进一步对其研究,构建血脑屏障的体外模型.
　　方法:原代分离培养SD大鼠乳鼠脑微血管内皮细胞(brainmicrovascularendothelialcells,BMVEC),采用倒置显微镜观察细胞形态结构和生长规律,用免疫组化检测紧密连接蛋白claudin-5和ZO-1.内皮细胞与原代培养的星形胶质细胞在Transwell小室上建立BBB体外实验模型,用EVOM2观察跨膜电阻(Trans-epitheliumelectricalresistant,TEER)的动态变化,探讨血脑屏障模型建立以及特性.
　　结果:BMVEC培养至融合以后具有典型的“铺路石”样外观,claudin-5与Z0-1免疫组化证实细胞间形成紧密连接,单独培养BMVEC的TEER值为(161.5±1.96)Ω×cm2,共培养体外模型的TEER值为(185.4±3.25)Ω×cm2.
　　结论:建立的BBB体外模型在形态学.电阻方面具备了BBB的基本特性,并且在星胶存在下共培养模型使BBB形态结构更完整.
　　第二部分，目的:观察单纯培养BMEC及其与AS共培养两种模型条件下,缺氧-复氧时的变化
　　方法:分别对单独培养BMEC和AS与内皮共培养两个BBB两个体外模型.进行缺氧-复氧处理(缺氧4h,复氧1h,3h,6h,12h,24h),观察两者TEER值与紧密连接蛋白的变化.
　　结果:单独内皮细胞培养时,缺氧后电阻值有显著的下降,为(140.1±2.6)Ω*cm2
　　结论:缺氧后对单层BMEC的BBB模型有一定的破坏作用,在复氧后情况会有改善,但无法恢复到缺钱前状态.下一步进行共培养模型的实验.

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全文缩略词表

前言

参考文献

中文摘要

英文摘要

引言

材料与方法

一实验材料

二.试验方法

实验结果

1.SD大鼠乳鼠微血管内皮培养.

2体外BBB模型结果.(都是在transwell小室上进行试验)

讨论

参考文献

中文摘要

英文摘要

引言

材料与方法

一.实验材料

二.实验方法

结果

1,对内皮细胞进行OGD预实验,

2. 内皮细胞OGD后所得TEER值(Ω*cm2)

3 OGD对内皮细胞紧密连接蛋白ZO-1表达的影响

讨论

参考文献

综述一

参考文献

综述二

参考文献

致谢