棕榈酸诱导心肌细胞胰岛素抵抗体外模型的建立

摘要

目的：
　　高脂肪酸血症是胰岛素抵抗发生的重要原因之一。本研究旨在心肌细胞中建立棕榈酸（palmiticacid，PA）诱导胰岛素抵抗的体外模型，以用于筛选改善胰岛素抵抗的候选药物，并研究PA对大鼠心肌细胞系H9C2细胞胰岛素信号转导蛋白的影响，探讨PA诱导胰岛素抵抗发生发展的变化过程；利用此模型，筛选得到对胰岛素抵抗具有改善作用的药物—红景天苷，并进一步在整体动物水平上考察了其对糖尿病心肌病的治疗作用。
　　方法：
　　1.用0.25mM棕榈酸培养H9C2细胞24-48 h后，以改良的葡萄糖氧化酶-过氧化物酶（glucose oxidase-peroxidase，GOD-POD）方法观察细胞对葡萄糖的敏感性，用 Western blot方法检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase，AMPK)磷酸化及葡萄糖转运蛋白体4(glucose transporter4，GLUT4)蛋白的表达。
　　2.采用C57BL/KsJ近亲交配株常染色体隐性遗传衍化而来，属Ⅱ型糖尿病模型的db/db糖尿病小鼠，药物治疗8周后，B超检测心功能以及HE染色法检测形态学指标，观察红景天苷对糖尿病心肌病是否具有改善作用。
　　结果：
　　1.0.25mMPA处理24h时，PA能加强胰岛素信号通路，增加胰岛素敏感性，而相应的药物罗格列酮、T0070907、红景天苷均能减弱PA诱导的胰岛素信号加强；而PA处理48h后，胰岛素敏感性下降，形成胰岛素抵抗，罗格列酮、T0070907、红景天苷则能改善胰岛素抵抗，增加对胰岛素的敏感性。
　　2.在整体水平上，红景天苷能降低db/db糖尿病小鼠的心肌功能室间隔舒张末期厚度（IVSd），增加左心室短缩分数（FS），减轻心肌细胞的肥大，并逆转db/db小鼠心肌胰岛素信号通路，激活AMPK，上调GLUT4表达。
　　结论：在大鼠H9C2心肌细胞中建立了一种棕榈酸诱导的胰岛素抵抗体外模型，在此模型上筛选到的红景天苷对糖尿病心肌病具有治疗作用。

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前言

第一部分 棕榈酸诱导心肌细胞胰岛素抵抗体外模型的建立

材料和方法

1. 材料

2. 实验方法

3. 实验结果

讨论

结论

第二部分 红景天苷对糖尿病心肌病的作用

材料和方法

1. 材料

2. 方法

3.实验结果

讨论

结论

参考文献

综述

致谢