脂肪干细胞来源的神经祖细胞移植治疗坐骨神经损伤的研究

摘要

目的：研究体外培养的脂肪干细胞（ADSCs）来源的神经祖细胞移植治疗坐骨神经损伤的可行性，初步探讨其可能机制。
　　方法：⑴在含20ng/ml EGF，20ng/ml FGF-2，2％B27的无血清培养基中培养大鼠ADSCs，传至第2代，用携带绿色荧光蛋白（GFP）的慢病毒转染ADSCs，继续传代至第4-5代时将其诱导形成神经祖细胞。
　　⑵将42只大鼠随机分为两组，每组21只。移植组：采用钳夹法建立坐骨神经损伤模型，神经膜下注射带GFP标记的ADSCs源性的神经祖细胞。对照组：注入同等量的细胞悬浮液。
　　⑶检测指标包括：①术后每周进行大鼠步态分析测量坐骨神经功能指数（SFI），共6周。②术后每周行肌电图检查测量坐骨神经运动神经传导速度（MCV）及肌肉复合动作电位波幅（CMAP）的检查，共6周。③术后第6周测量腓肠肌湿重比。④取移植组术后1天、7天、14天、21天、28天、35天、42天的标本进行GFP的检测，确定移植细胞的存活状态。⑤术后6周对损伤区域移植细胞进行施万细胞标记物（GFAP）的检测，并与GFP进行双标检测，以确定移植细胞是否分化。
　　结果：术后4-6周移植组坐骨神经功能指数测量优于对照组；术后6周运动神经传导速度恢复率及肌肉复合动作电位波幅恢复率、腓肠肌湿重比细胞移植组较对照组高，差异有统计学意义（P﹤0.05）；术后1-6周均可检测到带GFP标记的阳性细胞，移植的细胞部分可表达施万细胞标记物GFAP。
　　结论：体外培养的ADSCs源性的神经祖细胞体内移植后，可在损伤的神经区域存活、迁移并分化，促进神经纤维的修复，减少腓肠肌的萎缩。

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前言

第一部分 脂肪干细胞来源的神经祖细胞移植治疗坐骨神经损

实验材料与方法

实验结果

讨论

参考文献

第二部分 论文综述

参考文献

附录

致谢