声明
第一部分 Erastin诱导去势抵抗性前列腺癌细胞发生铁死亡
前言
实验材料
1. 主要试剂
2. 主要仪器和设备
实验方法
1. 细胞复苏、培养以及消化、传代
2. MTT检测摸索适宜的erastin浓度
3. MTT检测研究erastin及铁死亡抑制剂对CRPC细胞影响
5. 电镜检测细胞形态学改变
5. Western blot检测erastin处理的CRPC细胞其细胞内caspase3、LC3蛋白水平改变
实验结果
1.Erastin抑制CRPC细胞活力，并且能够被特异性铁死亡抑制剂逆转
2.经erastin处理CRPC细胞发生线粒体、内质网肿胀变性改变
4. Western blot检测经erastin处理的CRPC细胞内caspase3、LC3B蛋白水平无明显变化
第二部分 去势抵抗性前列腺癌细胞铁死亡过程中过氧化水平以及Nrf2/HO-1蛋白水平改变
前言
实验材料
1. 主要试剂
2. 主要仪器和设备
实验方法
1. 细胞复苏、培养以及消化、传代
2.流式细胞仪检测CRPC细胞ROS水平
3.MDA试剂盒检测CRPC细胞过氧化水平
4. Western blot检测erastin处理的CRPC细胞其细胞内Nrf2、Keap1、HO-1蛋白水平改变
实验结果
1. 流式细胞仪及MDA试剂盒检测发现CRPC细胞铁死亡过程中其过氧化水平升高
2.Western blot测得经erastin处理的CRPC细胞内Nrf2、HO-1水平增加，Keap1蛋白水平降低
第三部分 沉默Nrf2/HO-1对去势抵抗性前列腺癌细胞铁死亡影响研究
前言
实验材料
1. 主要试剂
2. 主要仪器和设备
实验方法
2.转染慢病毒包装的Nrf2 shRNA、HO-1 shRNA
3. MTT检测研究沉默Nrf2/HO-1对CRPC铁死亡的影响
4. 流式细胞仪及MDA试剂盒检测沉默细胞过氧化及ROS变化
5. Western blot检测Nrf2沉默细胞其细胞内Nrf2、HO-1蛋白水平改变
6. 利用荧光技术检测沉默Nrf2/HO-1基因，对CRPC细胞内氧化水平影响
实验结果
讨论
参考文献
综述:前列腺癌治疗的新进展
参考文献
英文缩略词表
致谢
