1. 引言
2. 材料与方法
2.1.1 临床标本
2.1.2 实验细胞系及动物
2.1.3 实验仪器
2.1.4实验试剂
2.1.5 质粒、病毒载体构建
2.1.6 小干扰RNA构建
2.2 实验方法
2.2.1 实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)
2.2.2 细胞培养、传代
2.2.3 细胞转染
2.2.4 CCK-8细胞活性检测
2.2.5 EDU增殖检测
2.2.6 细胞集落形成
2.2.7 流式细胞学检测细胞凋亡及细胞周期
2.2.8 细胞Tunel检测
2.2.9 细胞迁移及侵袭能力检测
2.2.10 动物成瘤实验
2.2.11 免疫组化
2.2.12 蛋白免疫印迹实验
2.2.13统计学分析
3. 实验结果
3.1 长链非编码CRNDE 在骨肿瘤的组织及骨肉瘤细胞系中高表达
3.2 CRNDE的表达受到启动子结合蛋白SP1的调控
3.3 CRNDE促进肉瘤细胞增殖,敲低CRNDE 导致骨肉瘤细胞凋亡
3.4 敲出CRNDE 导致细胞周期G0/G1期阻滞,CRNDE促进骨肉瘤细胞的侵袭及迁移
3.5 靶向沉默CRNDE 抑制骨肉瘤瘤体的生长
3.6 CRNDE 通过Wnt/β-catenin信号通路促进骨肉瘤上皮间质化
4. 讨论
5. 结论
参考文献
综述:长链非编码RNA CRNDE对肿瘤预后的荟萃分析
参考文献
攻读硕士学位期间的研究成果
致谢