声明
英文缩写词表
前言
参考文献
材料与方法
1.1实验仪器
1.2实验试剂
1.3主要试剂配置
2.PC12细胞系的培养
3. 用β-半乳糖苷酶来测定衰老细胞
4.CCK8试剂检测细胞活性
5.透射电镜观察
6.线粒体膜电位检测
7. Annexin V-FITC法检测细胞凋亡
8.细胞内ATP含量检测
9.超氧化物歧化酶(SOD)活力检测
10.细胞内丙二醛(MDA)水平的检测
11.细胞内的过氧化氢酶(CAT)活力的检测
12.细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)水平的检测
13.Tunel染色检测细胞凋亡
14.线粒体DNA4834bp常见缺失(Common Deletion, CD)检测
14.1 DNA试剂盒提取DNA
14.2测定CD缺失率
15.细胞内蛋白的提取
16.蛋白质免疫印迹
17.统计分析
结果
1.β-半乳糖苷酶衰老染色
2.细胞活性检测
3.CD缺失率检测
4.电镜下细胞的超微结构
5. TUNEL染色
6.流式细胞术检测细胞凋亡
7.线粒体膜电位检测
8.细胞SOD、MDA、CAT和GSH检测
9.Western blot检测蛋白水平
讨论
1.PC12细胞拟老化模型的建立
2.二甲双胍对拟老化细胞模型的保护
3.AMPK和ERK1/2信号通路参与二甲双胍的抗衰老作用
参考文献
综述:二甲双胍与衰老和寿命的关系及其机制
参考文献
致谢