合欢皮抗焦虑部位血清药物化学初步研究及其化学成分分离

摘要

21世纪随着人们生活节奏的加快，工作压力的增大，主要威胁人类健康的疾病已经发生了变化，精神性疾病逐渐成为了威胁现代人类健康的主要疾病之一；焦虑障碍已经成为临床上常见的一类心理疾病。从中药中寻找和开发具有抗焦虑作用的药物，是当前治疗精神性疾病的药物研究热点之一。2015版《中国药典》中记载了合欢皮具有解郁安神的功效，临床常用于心神不安，忧郁失眠等病症。已有研究表明合欢皮提取物具有抗焦虑作用；为寻找更好的抗焦虑天然药物，本课题组对合欢皮进行了较深入的研究。本论文在课题组前期研究的基础上，对合欢皮抗焦虑部位的血清药物化学进行了初步研究及其化学成分分离，初步探索了其抗焦虑作用的物质基础，研究工作如下：
　　对合欢皮抗焦虑部位体外成分的特征图谱进行了研究。采用UPLC技术，AcquityTMUPLC BEHC18色谱柱（50mm×2.1mm,1.7μm），乙腈-水为洗脱系统，流速0.3ml/min，柱温40℃，对10批合欢皮抗焦虑部位进行了分析，考察了液相的色谱条件、流动相的梯度、仪器的精密度、方法的重复性等，并采用UPLC-Q-TOF-MS法对合欢皮抗焦虑部位特征图谱中的部分的色谱峰进行了归属。结果，建立了合欢皮抗焦虑部位的特征图谱，标定了特征图谱中共有的13个峰，各共有峰分离度较好，方法重现性及样品稳定性好；鉴定了其中11个色谱峰，主要为木脂素类成分，其次为三萜皂苷类。
　　应用UPLC-Q-TOF-MS分析技术，对合欢皮抗焦虑部位的血清药物化学进行了初步研究。对供试品的制备方法（溶解溶剂、最佳采血时间点、血清蛋白的沉淀方法）及质谱分析条件进行了考察。结果，利用50％甲醇作为供试品的溶解剂、利用甲醇作为沉淀蛋白的溶剂、给药后30min采血为最佳采血点，建立了合欢皮抗焦虑部位含药血清的特征图谱。通过比较含药血清、空白血清及合欢皮抗焦虑部位的特征图谱,初步鉴定出5个以原型成分入血的化合物,分别为glaberide I；（-）-sy ringaresinol-4-4'-bis-O-β-D-glucopy ranoside；（-）-syringa resinol-4-o-β-D-glu copyranoside；5,5'-dimethoxy-7-oxolaricir esinol；（-）-丁香树脂酚。
　　采用硅胶柱、中低压制备柱、薄层制备色谱技术，对合欢皮抗焦虑部位进行了化学成分的分离，采用MS、1H-NMR、13C-NMR等技术对分离得到的化合物进行了结构鉴定。结果，从合欢皮抗焦虑部位中分离得到6个单体化合物，分别为：(-)-丁香树脂酚-4-O-β-D-葡萄糖苷;2,6-dimethoxy-4-hydroxyphenol-1-O-D-glucopyranoside；大豆苷( daidzin)；(-)-丁香树脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖;（-）-丁香树脂酚;（-)-丁香树脂-4,4’-bis-β一D-葡萄糖苷。

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前言

第一章 合欢皮抗焦虑部位UPLC特征图谱研究

1、实验仪器与材料

1.1实验仪器

1.2 试 药

2、实验内容与结果

2.1 供试品溶液的制备

2.2色谱条件的选择

2.3方法学考察

2.4共有峰的的标定

2.5结果

3、讨论

第二章 合欢皮抗焦虑部位血清药物化学初步研究

1、 实验仪器与材料

1.1 实验仪器

1.2试 剂

1.3实验动物

2、 实验内容与结果

2.1 供试品的制备

2.2 分析条件

2.3 UPLC-Q-TOF分析条件的优化

2.4最佳采血点的考察

2.5结果

3、 讨论

第三章合欢皮抗焦虑部位化学成分研究

1 、实验仪器与材料

1.1 药 材

1.2 试 药

1.3 仪 器

2、实验内容与结果

2.1抗焦虑部位的提取

2.2化学成分分离

2.3化学成分结构解析

结语与创新

文献综述：中药化学成分分离技术及血清药物化学研究概况

参考文献

附录

已发表论文

致谢