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甜菜M14单体附加系附加染色体BIBAC芯片的开发与应用

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论文说明:缩略词表

第1章前言

第2章材料和方法

第3章结果

第4章分析与讨论

结 论

附 录

致 谢

参考文献

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摘要

在栽培甜菜与野生白花甜菜连续杂交和回交的过程中,分离得到具有无融合生殖特性的甜菜M14品系,该品系附加有白花甜菜9号染色体,通过对连续四代甜菜M14品系附加染色体传递率分析,发现该染色体随母本的传递率为97%,子代在形态上也基本一致,因此把无融合生殖基因或相关基因定位于附加的白花甜菜9号染色体上。 利用已构建的甜菜M14品系的BIBAC文库筛选出2,377个白花甜菜9号染色体BIBAC克隆,组成9号染色体BIBAC文库,该文库平均插入片段为127kb,库覆盖白花甜菜9号染色体(80Mb)3.4倍。对这些克隆分别进行BIBAC质粒DNA的提取等一系列操作,构建一种不同于常规基因芯片的BIBAC芯片,经过阳性探针和随机引物探针检测,证明该芯片制备重复性好、背景噪声低、杂交信号清晰。 利用已构建的BIBAC芯片和甜菜M14与栽培甜菜的花期表达的mRNA制备的荧光标记探针对附加的白花甜菜9号染色体BIBAC文库进行初步表达分析,来筛选在M14品系胚胎发育中特异表达的克隆,不仅仅缩小了甜菜无融合生殖研究的范围,更为以后克隆无融合生殖基因提供可靠的材料来源和技术平台。

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