化瘤散结丹（含药血清）诱导人宫颈癌细胞系Hela细胞凋亡的实验研究

摘要

研究目的:1.运用血清药理学方法研究抗肿瘤新药化瘤散结丹对人宫颈癌细胞系HeLa细胞的生长抑制作用和凋亡诱导作用及对细胞周期的影响.2.探讨化瘤散结丹抗肿瘤作用的可能机理.3.了解化瘤散结丹的急性毒理效应.研究方法:1.按照血清药理学方法的要求制备含药血清:将化瘤散结丹制成水煎剂给家兔灌胃,获取兔血并分离血清.2.细胞培养:将人宫颈癌细胞系HeLa细胞接种在含10％胎牛血清的RPMI-1640培养基中,置37℃含5%C0<,2>的培养箱中培养.3.选择不同浓度的含药血清与人宫颈癌细胞系HeLa细胞共同作用24小时,用倒置显微镜观察细胞形态学改变;用MTT还原法检测光密度值(OD值),计算抑制率;用流式细胞术(FCM)检测化瘤散结丹诱导HeLa细胞凋亡的效应以及对细胞周期的影响.4.急性毒性实验采用小鼠以口服灌胃方式给药,连续观察7天,统计动物死亡数,获取相关实验数据并用改良寇氏法测定其LD<,50>.研究结论:1.化瘤散结丹(含药血清)可抑制人宫颈癌细胞系HeLa细胞的生长;2.化瘤散结丹(含药血清)大、中剂量组可诱导HeLa细胞凋亡;3.化瘤散结丹(含药血清)对HeLa细胞增殖周期有影响;细胞周期G<,2>/M期阻滞可能是化瘤散结丹诱导HeLa细胞凋亡的机制之一.4.化瘤散结丹(含药血清)诱导HeLa细胞凋亡与药物浓度及作用时间相关:浓度太小,时间太短(2.5%,12h)不足以诱导凋亡;浓度太高,时间太长(15%,36h)容易引起细胞坏死.5.化瘤散结丹经口灌胃的LD<,50>为:10.11g/kg;化瘤散结丹具有一定的毒性.

目录

英文缩略语表

前言

第一部分：化瘤散结丹（含药血清）对HeLa细胞生长的抑制作用及其机理的研究

实验一：化瘤散结丹（含药血清）对HeLa细胞生长增殖的影响

材料与方法

结果

实验二：化瘤散结丹（含药血清）对HeLa细胞凋亡率及细胞周期的影响

材料与方法

结果

讨论

1中药血清药理学方法及其意义

2.化瘤散结丹的现代药理学研究及组方依据

3.MTT还原法的原理与特点

4.细胞凋亡的检测方法的评价与流式细胞仪检测细胞凋亡的优势

5.细胞增殖和凋亡与宫颈组织癌变的关系

6.化瘤散结丹抑制Hela细胞增殖、诱导HEela细胞凋亡机理的探讨

7.本实验研究中存在的不足以及进一步研究的设想

第二部分：化瘤散结丹的急性毒性实验

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

中药诱导肿瘤细胞凋亡的研究概况（文献综述）

参考文献

致谢