南大西洋深海沉积物可培养真菌的多样性与生物活性研究

摘要

随着科技的日益进步和人们对地球认知的加深，研究人员们将探索的目光从陆地转向了海洋，尤其是生态环境特殊的深海，一个极丰富的生物资源宝库被挖掘出来。真菌作为深海微生物家族的重要成员，随之成为了开发海洋生物的新兴资源。复杂的深海环境孕育着相比于陆地真菌更加多样的深海真菌，而其代谢产物的活性也成为时下研究的热点。
　　本研究先对南大西洋深海15份沉积物内真菌进行平板法分离培养得到29株真菌，并通过ITS rDNA基因序列对分离菌株进行鉴定，得知它们分别属于Cladosporium（枝孢属）、Aspergillus（曲霉菌属）、Alternaria（链格孢属）、Penicillium（青霉属）4个属。这些真菌具有较丰富的物种多样性，其中Penicillium为优势属。
　　再依据牛津杯法、Tip-culture法、MTT法等实验检测各菌株的抗细菌、抗酵母菌、抗产毒真菌活性及细胞毒活性，经筛选发现：
　　（1）海水PDA发酵的菌株上清液对酿酒酵母菌、产气肠杆菌、枯草杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有抑制作用的菌株分别为6株、3株、2株、1株、1株；对寄生曲霉突变株NFRI-95有抑菌、抑毒效果的菌株分别有8株、14株，其中4株完全抑菌，8株完全抑毒；对病原真菌小麦镰刀菌有抑菌效果的菌株有10株，其中1株菌完全抑菌。海水PDA发酵的菌丝体有机试剂提取物对枯草杆菌、产气肠杆菌有抑制作用的菌株分别为8株、2株；分别有3株、17株菌株对寄生曲霉突变株NFRI-95有抑菌抑毒效果和抑毒效果；有5株菌株对病原真菌小麦镰刀菌有抑制作用。
　　（2）淡水PDA发酵的菌株上清液内对产气肠杆菌和枯草杆菌有抑制作用的菌株分别为3株、1株；对寄生曲霉突变株NFRI-95有抑菌效果、抑毒效果的菌株分别为8株、15株，其中1株完全抑菌，5株完全抑毒；对病原真菌小麦镰刀菌有抑菌效果的菌株有15株，其中1株菌完全抑菌。淡水PDA发酵的菌丝体有机试剂提取物对寄生曲霉突变株NFRI-95有抑菌抑毒效果的有1株，仅有抑毒效果的菌株有6株。
　　（3）发现一株对肿瘤Hela细胞有细胞毒活性、对人正常细胞无细胞毒活性的菌株MIE14。
　　最后对高活性菌株13-3T和MHE23进行均匀设计发酵优化，以期其充分发挥各自的抑菌能力。实验发现菌株13-3T的最佳发酵培养基为淀粉A发酵培养基，初步优化发酵条件为培养温度21℃、培养时间4.12-6.57d、接种量7.05-8.61％、海水用量50.89-100%、pH值7.7-8.2；菌株MHE23的最佳发酵培养基为淀粉B发酵培养基，初步优化发酵条件为培养温度21℃、培养时间10.83d、接种量5.35%、海水用量9.87%、pH值8.2。

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目录

第1章 绪 论

1.1 课题来源及研究的背景意义

1.2 国内外研究现状

1.3 主要研究内容

第2章 深海真菌的分离与鉴定

2.1 材料

2.2 实验方法

2.3 结果与讨论

2.4 本章小结

第3章 深海真菌活性菌株筛选

3.1 技术路线

3.2 实验材料

3.3 实验方法

3.4 结果与讨论

3.5 本章小结

第4章 深海真菌的液体发酵优化

4.1 材料与方法

4.2 结果与讨论

4.3 本章小结

结论

参考文献

攻读硕士学位期间发表的论文及其他成果

声明

致谢