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【6h】

尖吻与钝吻细鳞鱼(Brachymystax lenok)消化酶活性的比较研究

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1引言

1.1鱼类消化酶的研究概况

1.2鱼类消化酶的种类和特性

1.2.1蛋白酶类

1.2.2碳水化合物酶类

1.2.3脂肪酶类

1.2.4其它酶类

1.3消化酶活性在鱼类消化器官中的分布

1.4影响消化酶活性的因素

1.4.1外界环境因子对消化酶活性的影响

1.4.2食性对消化酶活性的影响

1.4.3饲料种类对消化酶活性的影响

1.4.4外源性消化酶对内源性消化酶的影响

1.5不同生长阶段消化酶的研究

2材料与方法

2.1试验材料

2.2试验设备

2.3试验试剂

2.3.1蛋白酶测定试剂

2.3.2淀粉酶测定试剂

2.3.3脂肪酶测定试剂

2.3.4蛋白浓度测定试剂

2.3.5试验药品

2.4 pH梯度的设定

2.5样品采集

2.6酶分析样品的制备

2.7酶活性的测定

2.7.1蛋白酶活性测定

2.7.2淀粉酶活性测定

2.7.3脂肪酶活性测定

2.7.4蛋白浓度测定方法

2.8数据统计分析

3结果

3.1.不同种群间消化酶活性比较

3.1.1蛋白酶活性比较

3.1.2淀粉酶活性比较

3.1.3脂肪酶活性比较

3.2肠道不同部位消化酶活性比较

3.2.1蛋白酶活性比较

3.2.2淀粉酶活性比较

3.2.3脂肪酶活性比较

3.3不同消化器官间消化酶活性比较

3.3.1蛋白酶活性比较

3.3.2淀粉酶活性比较

3.3.3脂肪酶活性比较

3.4 pH对蛋白酶活性的影响

3.4.1 pH对胃蛋白酶活性的影响

3.4.2 pH对肠蛋白酶活性的影响

4讨论

4.1消化酶活力与食性

4.1.1蛋白酶活力与食性的关系

4.1.2淀粉酶活力与食性的关系

4.1.3脂肪酶活力与食性的关系

4.2消化酶活力与消化器官

4.2.1四种消化器官消化酶活力的差异

4.2.2肠道不同部位消化酶活性的差异

4.3消化酶活力与生长发育

4.4 pH与消化酶活力

5结论

致谢

参考文献

攻读硕士学位期间发表的学术论文

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摘要

消化酶是消化腺和消化器官分泌的起消化食物作用的酶类。研究消化酶的种类、分布和活性对了解鱼类消化生理、食性和生物学特征有着重要的意义,同时还可以直接服务于水产养殖业中的投饲管理和饲料配制。由于生态环境的日益严峻,细鳞鱼在我国的分布区域日益缩小,种群数量逐渐减少,有濒临灭绝的危险。为保护这一珍稀物种,一些单位开展了细鳞鱼的人工驯化,以人工饲料取代活饵,取得了一定的进展。本文测定了乌苏里江和牡丹江野生尖吻与钝吻种群、牡丹江野生种群的幼鱼和乌苏里江种群自繁F1代细鳞鱼的胃、食道、幽门盲囊、前肠、中肠、后肠中蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的分布与活性。结果如下: 消化酶在消化器官中呈现不同的分布规律:胃中蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活性均很高;幽门盲囊中脂肪酶和蛋白酶活力较高,淀粉酶活力较弱;肠道中脂肪酶和淀粉酶活力较高,蛋白酶活力较弱。这说明蛋白质的消化吸收主要在胃中,胃、肠道、幽门盲囊和食道均是碳水化合物消化的主要器官,脂肪的消化吸收主要集中在肠道和胃中。 消化酶活性在不同种群,以及同一个体不同组织和肠道之间的差异不同。不同种群成鱼之间蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性差异均不显著(p>0.05);牡丹江种群幼鱼幽门盲囊中脂肪酶活性显著高于牡丹江种群的成鱼(p<0.05),说明幼鱼的消化能力远远高于成鱼;乌苏里江种群自繁F1代食道中脂肪酶活性显著高于乌苏里江种群成鱼脂肪酶活性(P<0.05);乌苏里江种群自繁F1代的胃、幽门盲囊、食道和肠道中的淀粉酶活性均显著高于乌苏里江尖吻种群(p<0.05),这可能是自繁群体长期适应人工饲料的结果。 在所有种群中,成鱼肠道中蛋白酶活性顺序均为前肠>后肠>中肠,前肠蛋白酶活性显著高于中肠(P<0.05);牡丹江野生种群幼鱼肠道中的蛋白酶活性顺序是前肠>中肠>后肠,前肠蛋白酶活性显著高于后肠(p<0.05)。乌苏里江种群自繁F1代肠道中前肠淀粉酶活性显著高于中、后肠(P<0.01),淀粉酶活性顺序为前肠>中肠>后肠;其它种群的淀粉酶活性在肠道中均匀分布,无显著差异(p>0.05)。乌苏里江野生尖吻种群脂肪酶活性顺序为后肠>中肠>前肠,后肠脂肪酶活性显著高于中、前肠(P<0.05);乌苏里江野生钝吻种群脂肪酶活性顺序为前肠>后肠>中肠,前肠脂肪酶活性显著高于中肠(p<0.01);牡丹江野生尖吻、钝吻种群及幼鱼和乌苏里江种群自繁F1代脂肪酶活性在肠道中均匀分布,差异均不显著(p>0.05)。 苏里江野生钝吻种群和自繁F1代种群、牡丹江野生尖吻、钝吻种群和幼鱼消化器官中的蛋白酶活性顺序均为幽门盲囊>食道>胃>肠道,幽门盲囊蛋白酶活性显著高于肠道(p<0.05):乌苏里江野生尖吻种群消化器官中的蛋白酶活性顺序为胃>幽门盲囊>食道>肠道,胃和幽门盲囊中的蛋白酶活性显著高于食道和肠道(p<0.05)。乌苏里江野生尖吻种群消化器官中的淀粉酶活性顺序为胃>肠道>食道>幽门盲囊,胃中的淀粉酶活性显著高于肠道、食道(p<0.05)和幽门盲囊(p<0.01);乌苏里江野生钝吻、牡丹江野生尖吻种群及幼鱼各消化器官中淀粉酶活性差异不显著(p>0.05),它们淀粉酶活性顺序均为胃>肠道>食道>幽门盲囊;乌苏里江种群自繁F1代消化器官中的淀粉酶活性顺序为胃>幽门盲囊>肠道>食道。乌苏里江野生尖吻和钝吻种群、牡丹江钝吻种群、乌苏里江种群白繁F1代的各消化器官中的脂肪酶活性差异均不显著。 所有种群的胃蛋白酶最适pH值为2.6,肠蛋白酶最适pH值为10.2~10.4。 研究结果表明:四个不同的野生种群之间,无论是尖吻还是钝吻种群之间各种消化酶的活性差异不显著,这说明,吻端的形态差异并没有直接的影响到消化道中各种酶的活性:但是成鱼与幼鱼之间,野生种群与自繁人工养殖种群之间部分消化酶的活性差异显著,这说明,幼鱼的消化能力显著高于成鱼;自繁后代(人工养殖)显著高于野生种群,这可能是幼鱼适应高速生长发育和人工养殖群体适应高能量饲料的结果。

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