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声明
1引言
1.1鸡传染性支气管炎
1.2鸡传染性支气管炎流行病学的国内外研究现状
1.2.1鸡传染性支气管炎的国外流行情况
1.2.2鸡传染性支气管炎的国内流行情况
1.3鸡传染性支气管炎病毒概述
1.3.1 IBV分类地位
1.3.2 IBV病毒粒子结构
1.3.3鸡传染性支气管炎病毒基因组
1.4 IBV变异机制及生物进化
1.4.1 IBV变异理论基础
1.4.2变异原因
1.5 IBV基因分型研究进展
1.6研究目的和意义
2.材料和方法
2.1材料
2.1.1病料的收集
2.1.2鸡胚、鸡红细胞及SPF鸡
2.1.3主要试剂
2.1.4主要仪器设备
2.1.5标准毒株
2.1.6引物
2.2方法
2.2.1病毒的分离
2.2.2病毒的鉴定
2.2.3 EID50测定
2.2.4标准血清的制备
2.2.5中和试验
2.2.6病毒基因组RNA的提取
2.2.7 RT-PCR扩增
2.2.8 RT-PCR产物鉴定及纯化回收
2.2.9 RT-PCR产物连接与转化
2.2.10重组质粒的提取、鉴定及序列测定
2.2.11基因序列的确定及系统进化树分析
3结果
3.1病毒的鉴定
3.1.1 IBV-HA试验
3.1.2鸡胚矮小化试验
3.1.3鸡新城疫干扰试验
3.1.4电镜
3.1.5 S1基因的RT-PCR
3.2 EID50测定
3.3血清中和试验结果
3.4分离株S1基因序列分析
3.4.1分离株S1基因的序列分析
3.4.2分离株S1基因同源性分析
3.4.3 IBV分离株S1基因序列的系统进化树分析
3.4.4分离株S1蛋白氨基酸的缺失和插入比较
4讨论
4.1各种分离鉴定方法
4.1.I血凝试验
4.1.2鸡胚矮小化试验
4.1.3 NDV干扰试验
4.1.4形态学观察
4.1.5 RT-PCR方法
4.1.6分离株S1基因序列测定结果的鉴定
4.2血清分型
4.3分离株S1基因序列的变异情况及遗传衍化关系
5结论
致谢
参考文献
附 录:缩略语中英文注释
攻读硕士学位期间发表的学术论文