雌激素受体在小鼠早期胚胎发育中的表达

摘要

雌激素在小鼠的早期胚胎发育过程中起着很重要的作用。雌激素主要通过雌激素受体来发挥生物学作用。大量的研究表明，雌激素对胚胎发育的影响是有浓度、时期依赖性的。雌激素对无脊椎动物胚胎影响的研究很多，而且主要是毒性方面的研究，然而对雌激素是否对早期胚胎中雌激素受体表达的变化有影响，不同发育时期的表达又有何变化的研究还不是很清楚。应用RT-PCR检测了ERαmRNA和ERβmRNA在小鼠着床前胚胎中的表达，但是对ER蛋白的表达研究的还不是很多，尤其是ER的磷酸化形式在着床前胚胎发育过程中的表达一直未见报道。本实验以体外培养小鼠早期胚胎为研究对象，在KSOM培养基中添加雌二醇培养胚胎，应用激光共聚焦显微镜检测ERα、ERβ在小鼠早期胚胎发育过程中的表达规律，并首次研究了ER的磷酸化形式在小鼠早期胚胎发育中的表达。探讨雌激素是否对胚胎雌激素受体的表达有影响，为这领域提供理论依据。实验结果如下： 1.ERα在2-细胞、4-细胞时期有较弱的表达，8-细胞、桑葚胚时期几乎检测不到表达，囊胚期有高表达；ERβ从2-细胞到桑葚胚有低水平的表达，囊胚阶段表达上调；而在胚胎发育的每个时期都可以检测到phospho-ER的强表达。 2.雌激素处理后，ERα、ERβ在各个时期的表达都有上调，尤其是8-细胞、桑葚胚时期的表达明显增强。表明雌激素受体的合成是受雌激素诱导的，胚胎发育各个时期对雌激素的敏感性是不同的。 3.ER及其磷酸化形式在囊胚时期的高水平表达说明雌激素在后期胚胎的发育中有着重要的作用。

目录

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声明

1.引言

1.1雌激素受体的发现和命名

1.2雌激素受体的结构

1.2.1雌激素受体的基因结构

1.2.2雌激素受体的蛋白结构

1.3雌激素受体的定位

1.4雌激素受体的作用机制

1.4.1基因组途径

1.4.2非基因组途径

1.5雌激素受体组织分布的比较

1.5.1子宫

1.5.2卵巢

1.5.3乳腺

1.5.4下丘脑-垂体

1.5.5胚胎

1.6雌激素及受体与早期胚胎的发育

1.7目的和意义

2材料与方法

2.1主要器材和试剂

2.1.1主要器材

2.1.2实验试剂

2.2实验动物及处理

2.3胚胎的获取

2.3.1胚胎的体外培养

2.3.2实验用胚胎的选择

2.4激光共聚焦显微镜检测

3结果

3.1 ERα在体外培养小鼠早期胚胎发育中的表达情况

3.2 ERβ在体外培养小鼠早期胚胎发育中的表达情况

3.3 Phospho-serine-118ERα在体外培养小鼠早期胚胎发育中的表达情况

3.4 Phospho-serine-87ERβ在体外培养小鼠早期胚胎发育中的表达情况

4讨论

4.1实验结果的可靠性

4.2小鼠早期胚胎发育过程中ERα和ERβ的表达情况

4.3小鼠早期胚胎发育中磷酸化ERα和磷酸化ERβ的表达情况

4.4外源雌激素对雌激素受体表达变化的影响

5结论

致谢

参考文献

附图

攻读硕士学位期间发表的论文