谷氨酰胺对慢性冷应激雏鸡肝脏损伤的影响

摘要

冷应激是北方高寒地区动物，尤其是新生动物最普遍的应激原之一。由于冷应激可以导致动物生长性能及抗病力下降，已成为制约北方畜牧业健康发展的难题之一。因此开发抗冷应激药物或营养物质已成为当前营养生理学的研究热点之一。目前已有研究表明谷氨酰胺（Glutamine,Gln）对于创伤、感染、早期断奶等应激反应具有缓解作用。本试验以15d龄雏鸡为研究对象，复制雏鸡慢性冷应激模型，同时，在日粮中添加低、中、高三种剂量的Gln粉剂，检测受试雏鸡肝脏病理组织学变化、肝功能、血清及肝脏的抗氧化功能及NO代谢水平、肝细胞凋亡率和肝脏HSP70 mRNA表达水平，结果如下：
　　 1.冷应激组血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）活性、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、间接胆红素（IBIL）含量均高于对照组，Gln添加组上述指标相对于冷应激组均有不同程度的降低，以Gln高剂量组降低最明显；冷应激组血清总蛋白（TP）、白蛋白/球蛋白（A/G）均低于对照组，Gln添加组这两个指标相对于冷应激组均有不同程度的升高，以中、高剂量组最明显。表明添加中、高剂量的Gln对冷应激所致雏鸡肝功能的损伤具有缓解作用。
　　 2.冷应激组血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）和肝组织SOD活性持续降低，肝组织GSH-Px活性早期保护性升高，中、后期明显降低，丙二醛（MDA）含量升高，肝脏 GSH-Px mRNA表达量先升高后降低；添加中、高剂量的Gln可以显著提高GSH-Px、SOD活性，降低MDA含量，提高肝脏 GSH-Px mRNA表达量。表明添加中、高剂量的Gln对冷应激造成的氧化损伤具有缓解作用。
　　 3.冷应激时血清中NO含量和NOS活性升高，肝脏中NO含量、NOS活性及iNOS mRNA表达水平呈现先降低后升高的趋势；Gln添加组血清及肝脏NO含量和NOS活性、肝脏iNOS mRNA表达水平均有不同程度的降低，表明Gln可以通过影响血清及肝脏内NO的代谢以及肝脏iNOS mRNA的表达水平，来发挥其对雏鸡肝脏的保护作用。
　　 4.冷应激组雏鸡肝细胞凋亡率相对于对照组明显增加，线粒体和内质网损伤，添加Gln后降低了肝细胞凋亡率及细胞器的损伤程度。从细胞水平上说明Gln对冷应激引起的肝细胞凋亡具有缓解作用。
　　 5.冷应激中、后期肝脏HSP70 mRNA表达水平显著降低，而添加Gln提高了冷应激全过程肝脏HSP70 mRNA的表达水平。从分子水平上说明Gln能缓解冷应激对雏鸡肝脏的损伤。
　　 上述指标检测结果从器官、细胞和分子水平上探讨了慢性冷应激对雏鸡肝损伤作用及Gln的保护作用，揭示了Gln可在多个环节抵抗慢性冷应激对雏鸡肝脏的损伤，发挥其保护作用。