不同程度奶牛乳腺炎乳中相关酶与急性蛋白的研究

摘要

奶牛乳腺炎是造成奶牛业经济损失最大的疾病之一，他不仅影响奶牛产奶量，同时也影响牛奶品质，危害人类健康。特别是奶牛隐性乳腺炎发病时乳汁无肉眼可见变化，奶牛机体也无任何临床症状，往往被人们忽视，贻误最佳诊断时机，造成更大的经济损失。因此如何对奶牛乳腺炎做出早期诊断已倍受人们的关注。国内目前奶牛乳腺炎主要通过测定乳中体细胞数（Somatic Cell Count，SCC）来进行诊断，但由于需要专业的操作人员，以及昂贵的费用等局限性影响了该方法在临床中的应用。因此，本试验通过研究不同程度乳腺炎乳中相关酶与蛋白的含量变化，探讨奶牛发生乳腺炎时，是否与乳腺炎发病程度存在一定联系，是否可为判定乳腺损伤提供重要理论依据。为日后寻找和筛选一种在乳腺炎早期实时诊断和普遍适用的方法奠定了良好的基础。
　　 本研究将哈尔滨某奶牛场奶牛经乳中体细胞数（Somatic Cell Count，SCC）法选取40头奶牛：将其分为c组（对照组SCC<50万个/ml）、Ⅰ组（轻度性隐性乳腺炎组50500万个/ml）。然后对乳中碱性磷酸酶（ALP）、酸性磷酸酶（ACP）、乳酸脱氢酶（LDH）、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAGase）、过氧化氢酶（CAT）、髓过氧化物酶（MPO）采用比色法进行测定；乳中淀粉样蛋白A（SAA）、结合珠蛋白（HP）、C-反应蛋白（CRP）采用间接ELISA进行检测，并对乳中乳脂率、蛋白率、乳糖、总固体的含量进行比较分析。
　　 本研究结果发现：
　　 不同程度乳腺炎乳中ALP、ACP、LDH、NAGase、CAT、MPO的含量随着乳腺炎的严重程度的增加而呈上升趋势，均高于C组（P<0.05或P<0.01）。其中乳中LDH、NAGase的含量上升幅度最大：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组乳中LDH的含量分别是C组的2.30、4.91、9.25倍；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组乳中NAGase含量分别是C组的2.99、5.51、9.47倍。药物治疗后上述指标与用药前相比均有不同程度下降（P<0.05或P<0.01），并基本恢复到健康水平。
　　 不同程度乳腺炎乳中SAA、HP的含量随着乳腺炎的严重程度的增加而呈上升趋势，均高于C组（P<0.05或P<0.01），其中不同程度乳腺炎乳中HP含量Ⅰ组与C组无统计学差异。不同程度乳腺炎乳中CRP含量与C组无统计学差异：药物治疗后不同程度乳腺炎乳中SAA、HP含量与用药前相比均有不同程度下降（P<0.05或P<0.01），不同程度乳腺炎乳中CRP的含量与药前相比均无统计学差异。
　　 不同程度奶牛乳腺炎乳中乳脂、乳糖含量随着乳腺炎的严重程度的增加而呈下降趋势，均低于对照组（P<0.05或P<0.01）；不同程度奶牛乳腺炎乳中蛋白率、总固体含量随着乳腺炎的严重程度的增加而呈上升趋势，均高于对照组（P<0.05或P<0.01）；药物治疗后不同程度奶牛乳腺炎上述指标与用药前相比均有不同程度下降（P>0.05或P<0.05），仅有乳糖含量恢复到了健康水平。
　　 本研究表明，不同程度奶牛乳腺炎乳中LDH、NAGase、SAA、乳中蛋白的含量可为奶牛乳腺损伤的判定提供重要依据。

目录

文摘

英文文摘

Contents

1 引言

1.1 奶牛乳腺炎研究进展

1.1.1 乳腺炎的病因

1.1.2 乳腺炎的分类

1.1.3 乳腺炎的诊断

1.1.4 乳腺炎的治疗

1.1.5 乳腺炎的综合防治

1.2 相关酶类与乳腺炎的关系

1.2.1 碱性磷酸酶（ALP）

1.2.2 酸性磷酸酶（ACP）

1.2.3 乳酸脱氢酶（LDH）

1.2.4 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAGase）

1.2.5 过氧化氢酶（CAT）

1.2.6 髓过氧化物酶（MPO）

1.3 相关蛋白与乳腺炎的关系

1.3.1 血清淀粉样蛋白（SAA）

1.3.2 结合珠蛋白（HP）

1.3.3 C-反应蛋白（CRP）

1.4 研究的目的和意义

2 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 药品与试剂

2.1.2 主要仪器与设备

2.1.3 试验动物

2.2 方法

2.2.1 样品的采集与处理

2.2.2 相关酶类因子的测定原理及操作流程

2.2.3 相关蛋白因子的测定原理及操作流程

2.2.4 对不同程度乳腺炎乳中相关成分的分析

2.3 实验数据处理

3 结果与分析

3.1 用药前不同程度奶牛乳腺炎乳中相关酶含量的测定

3.2 用药前不同程度奶牛乳腺炎乳中相关急性时相蛋白的含量测定

3.3 用药前不同程度奶牛乳腺炎乳中总固体、蛋白、乳糖、乳脂的含量测定

3.4 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳中乳酶用药后的含量变化

3.4.1 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳中ALP的含量变化

3.4.2 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳中ACP的含量变化

3.4.3 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳中LDH的含量变化

3.4.4 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳中CAT的含量变化

3.4.5 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳中NAGase的含量变化

3.4.6 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳中MPO的含量变化

3.5 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳中相关急性时相蛋白的含量变化

3.5.1 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳中SAA的含量变化

3.5.2 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳中HP的含量变化

3.5.3 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳中CRP的含量变化

3.6 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳中总固体、蛋白、乳糖、乳脂的含量变化

3.6.1 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳汁中总同体含量变化

3.6.2 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳中蛋白含量变化

3.6.3 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳汁中乳糖含量变化

3.6.4 用药后不同程度奶牛乳腺炎乳汁中乳脂含量变化

4 讨论

4.1 各种酶在乳腺炎诊断中的作用

4.1.1 ALP在乳腺炎诊断中的作用

4.1.2 ACP在乳腺炎诊断中的作用

4.1.3 不同程度乳腺炎乳中LDH测定的作用

4.1.4 NAGase在乳腺炎诊断中的作用

4.1.5 不同程度乳腺炎乳中CAT测定的作用

4.1.6 不同程度乳腺炎乳中MPO测定的作用

4.2 SAA、HP、CRP在乳腺炎诊断中的作用

4.2.1 SAA在乳腺炎诊断中的作用

4.2.2 HP在乳腺炎诊断中的作用

4.2.3 CRP在乳腺炎诊断中的作用

4.3 不同程度乳腺炎乳中乳脂、蛋白、乳糖、总固体测定的的作用

5 结论

致谢

参考文献

攻读学位期间发表的学术论文