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黏菌素对鸡源大肠杆菌的野生型折点建立及耐药性的研究

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摘要

1引言

1.1鸡大肠杆菌病的相关研究

1.1.1鸡大肠杆菌病发病情况及危害

1.1.2鸡大肠杆菌病流行病学特点

1.1.3鸡大肠杆菌病的防治措施

1.2多黏菌素的概述

1.2.1多黏菌素的发展史

1.2.2多黏菌素的理化性质

1.2.3多黏菌素抗菌作用机理

1.2.4多黏菌素耐药机制

1.2.5黏菌素抗性基因mcr(1~5)的探讨

1.2.6产NDM-1肠杆菌的探讨

1.2.7黏菌素体外联合用药

1.3抗菌药物敏感性试验及判定标准

1.3.1折点的分类

1.3.2野生型折点的研究

1.4研究目的与意义

2材料与方法

2.1试验材料

2.1.1菌株

2.1.2药品与试剂

2.1.3培养基和常用溶液配制

2.1.4实验器材

2.2试验方法

2.2.1技术路线图

2.2.2样本采集

2.2.3大肠杆菌的分离

2.2.4大肠杆菌的鉴定

2.2.5大肠杆菌的保存

2.2.6黏菌素对大肠杆菌MIC测定

2.2.7野生型折点的确定

2.2.8 E.coli对其他抗生素的药物敏感性试验

2.2.9 PCR法检测mcr (1~5)及NDM-1基因

2.2.10多位点序列分型

2.2.11黏菌素联合用药筛选

3结果与分析

3.1鸡大肠杆菌鉴定结果

3.1.1初步分离

3.1.2革兰氏染色鉴定

3.1.3生化鉴定

3.1.4 16S rRNA PCR鉴定

3.2黏菌素对大肠杆菌MIC的测定结果

3.3野生型折点的制定

3.4 E coli对其他抗生素药物敏感性试验

3.5 PCR扩增mcr(1~5)及NDM-1基因

3.6多位点序列分型

3.7黏菌素联合药物筛选

3.7.1黏菌素与阿米卡星联用的抗菌作用

3.7.2黏菌素与多西环素联用的抗菌作用

3.7.3黏菌素与庆大霉素联用的抗菌作用

3.7.4中药联合用药筛选

4讨论

4.1黏菌素对大肠杆菌的MIC测定

4.2野生型折点的制定

4.3 E.coli对其他抗生素的药物敏感性实验

4.4 PCR扩增mcr(1~5)及NDM-1基因

4.5黏菌素联合用药筛选

5结论

致谢

参考文献

攻读硕士学位期间发表的学术论文

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