欧李品种间两种分子标记和营养指标的遗传变异的研究

摘要

本研究以来自北京林业局种苗站提供的8个欧李品种为试验材料，对不同时间的欧李可溶性糖及可溶性蛋白含量变化进行测定与分析;建立了SRAP-PCR和ISSR-PCR最佳反应体系，同时运用ISSR分子标记对8个品种欧李的遗传多样性进行了研究，发现欧李不同品种间可溶性糖及可溶性蛋白含量存在着明显的差异。本研究中，植株生长不同时期提取的可溶性糖含量唐山和农大三号含量较高，而农大四号和黄山店最小;同样的，在对不同时期提取的可溶性蛋白含量分析也得出同样的结论:唐山和农大三号含量较高，而农大四号和黄山店最小。以欧李不同品种间可溶性糖及可溶性蛋白含量变化为依据，初步确定唐山和农大三号为优良品种。主要研究结果如下：
　　8个不同品种欧李的ISSR分子标记遗传多样性分析结果表明:11个引物对全部80个个体共扩增出61个多态位点，多态位点的比率为78.21％，平均每个引物5.5个多态位点。用Shannon指数估计8个欧李品种的遗传多样性水平为:唐山＞怀柔-喇叭沟门＞农大五号＞农大四号＞农大三号＞怀柔-汤河口＞延庆千家店＞黄山店。欧李不同品种间发生了一定的遗传分化，品种间的遗传变异占总遗传变异的25.32％，74.68％的遗传变异分布在品种内的个体间，表明欧李品种的变异主要来源于品种内。通过遗传距离矩阵聚类分析，将8个品种的欧李大体可以分为两类:怀柔-喇叭沟门、延庆千家店、怀柔-汤河口、农大三号、农大四号及农大五号遗传相似度较大，而唐山和黄山店品种与其他品种差异较大。
　　欧李不同品种间可溶性糖及可溶性蛋白含量存在着明显的差异。本研究中，植株生长不同时期提取的可溶性糖含量唐山和农大三号含量较高，而农大四号和黄山店最小;同样的，在对不同时期提取的可溶性蛋白含量分析也得出同样的结论:唐山和农大三号含量较高，而农大四号和黄山店最小。以欧李不同品种间可溶性糖及可溶性蛋白含量变化为依据，初步确定唐山和农大三号为优良品种。

目录

摘要

1 绪论

1．1 欧李简介

1．1．1 欧李特性

1．1．2 欧李的经济及其它应用价值

1．1．3 欧李的过氧化物酶同功酶研究

1．1．4 欧李的组培快繁

1．2 分子标记技术及其发展

1．2．1 RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)

1．2．2 RAPD(Random Amplified polymorphic DNA)

1．2．3 SSR(Simple Sequence Repeat)

1．2．4 ISSR(Inter-simple Sequence Repeat Polymorphism)

1．2．5 AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)

1．2．6 SRSAP(sequence-related amplified polymorphism)

1．3 本研究目的和意义

2 欧李品种间ISSR和SRAP体系优化

2．1 材料与方法

2．1．1 实验材料

2．1．2 实验仪器与药品

2．1．3 实验方法

2．2 结果与分析

2．2．1 欧李总DNA的提取

2．2．2 ISSR-PCR反应体系优化

2．2．3 SRAP-PCR反应体系优化

2．3 讨论

2．4 本章小结

3 利用ISSR分子标记检测欧李不同品种间的遗传差异

3．1 材料与方法

3．1．1 实验材料

3．1．2 实验仪器与药品

3．1．3 实验方法

3．2 结果与分析

3．2．1 ISSR引物筛选

3．2．2 欧李品种间ISSR标记遗传多样性分析

3．3 讨论

3．4 本章小结

4 欧李品种间不同月份营养成分含量及其相关差异性分析

4．1 材料与方法

4．1．1 实验材料

4．1．2 仪器与药品

4．1．3 实验方法

4．2 结果分析

4．2．1 欧李品种问不同月份可溶性糖含量比较

4．2．2 欧李品种间不同月份可溶性糖蛋白含量比较

4．2．3 欧李可溶性糖及可溶性蛋白的相关分析

4．2．4 欧李可溶性糖及可溶性蛋白的聚类分析

4．3 讨论

4．4 本章小结

结论

参考文献

附录

攻读学位期间发表的学术论文

致谢

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