叶酸介导EGCG白蛋白肿瘤靶向纳米粒的制备工艺优化与表征

摘要

儿茶素是茶叶中多酚类物质的主体,具有抗氧化、抗突变、防辐射、抗菌消毒等活性,是茶叶中的主要功能活性物质。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)占茶鲜叶中儿茶素含量的45％～65％,因此是绿茶中含量最为丰富、性质最为活泼的儿茶素类物质。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的抗氧化活性是维生素E的20倍、过氧化岐化酶(SOD)的6倍,具有明显的清除体内自由基、抗癌、抗炎、抗突变、抗衰老及改善肝功能等药理作用,现已成为儿茶素分离、纯化与临床应用研究的焦点。但是目前使用高剂量的EGCG注射剂来高效控制或是抑止肿瘤细胞生长与转移还非常的困难,这些都严重影响临床治疗的效果。
　　 靶向给药系统(TDDS)是一种新的制剂技术与工艺,他能将治疗药物最大限度得输送到靶器官,而对非靶器官影响很小,从而达到高效低毒的治疗效果,尤其适用于治疗癌症等疾病。靶向型药物是进行靶向给药系统并且能将药物直接送达需药目标部位的药物,它可使得药物到达需药部位的药量大大增加,从而减少用药量,降低药物的毒副作用。近年来,提高抗癌药物的局部浓度及对癌细胞的选择性,减少全身的毒副反应方面的研究取得了明显的进展。目前,各种靶向给药载体的研究已经取得了很大进展,发展靶向给药系统是当前药学发展的一个重要领域。
　　 纳米粒作为一种载体以无毒性能够增加所载物的溶解度和提高生物利用度等优点,在药物临床研究药理研究和生物分析等方面都得到了广泛应用。白蛋白纳米粒是以白蛋白作为载体,包封或吸附药物,经过固化分离进一步形成了实心的球体。白蛋白纳米粒作为药物运输的载体具有很多优点,能够减慢药物释放的时间,提高药物的稳定性使药物不会在进入体内的过程中被分解同时无毒副作用和免疫反应。因此对于白蛋白纳米粒载体的研究也越来越深入。
　　 本文主要是基于EGCG的抗肿瘤效用,运用纳米化和靶向型技术相结合制备叶酸介导的白蛋白纳米粒包裹EGCG(FA-EGCG-BSANP)。通过二水平析因设计软件进行了多影响因素的实验,并且得到了纳米化靶向制剂最优结果。同时采用了激光粒度仪,高效液相色谱等仪器对最优化的纳米药物进行检测,检测了药物的形貌特征和药物含量等。
　　 本课题研究结论得出:
　　 1.由二水平析因实验设计得出影响纳米药物粒径,包封率,载药量的主要因素。并对不同影响因素进行调整得到最优化结果；
　　 2.通过激光粒度仪和扫描电镜(SEM)检测得到纳米药物粒径为170nm左右,形状为球形排列紧密；
　　 3.高效液相色谱法测得纳米药物的包封率和载药量,所得结果为包封率(84.6±0.5)
　　 ％,载药量为(29.9±0.6)％；
　　 4.紫外分光光度法进行扫描,测定叶酸和白蛋白的偶联量,测定结果为,叶酸偶联量为18.363μg·mg-1BSA；
　　 5.通过检测药物在磷酸缓冲溶液中的释放得出了药物的体外释放数据,检测结果显示了EGEG在24小时内从药物中释放的情况。
　　 通过以上的检测可以得到制备FA-EGCG-BSANP的最佳优化条件,而且能够准确检测出其形貌特征,药物包裹的包封率、载药量和他的体外释放规律。为进一步研究该药物在体内的活性代谢和靶向性提供了重要依。