普生小球藻培养条件及脂肪酸提取工艺优化

摘要

本实验以从加拿大引进的转基因普生小球藻为原料，确定了适宜的培养基，探讨影响转基因普生小球藻生长的因素，优化得到了转基因普生小球藻的最佳培养条件，并对普生小球藻中脂肪酸的提取工艺进行了研究，实验结果如下:
　　1.通过分析考察，确定实验藻种为转eIF-5A基因普生小球藻，培养基为GMSC培养基。
　　采取单因素实验对转基因普生小球藻培养条件进行优化，确定了最优转基因普生小球藻培养条件，结果如下:
　　尿素:KH2PO4为4∶3
　　pH:8.5
　　培养温度:28℃
　　此条件下培养的转基因普生小球藻，提取其总脂肪酸，结果显示，脂肪酸得率可达到21.94％。
　　2.采取单因素实验对从普生小球藻提取脂肪酸的工艺进行优化，确定了最优脂肪酸提取工艺，结果如下:
　　提取方法:氯仿-甲醇提取法
　　溶剂用量:1g干藻粉加入10ml甲醇及20 ml氯仿
　　提取次数:2次
　　提取温度:40℃
　　在上述优化的条件下对转基因普生小球藻的总脂肪酸进行提取，脂肪酸提取率为18.10％。其中，亚油酸的含量为总脂肪的7.734％，亚麻酸的含量为总脂肪的15.544％，油酸的含量为总脂肪的13.239％，硬脂酸的含量为总脂肪的1.442％，棕榈酸的含量为总脂肪的17.766％。
　　本实验优化了转基因普生小球藻的培养条件及脂肪酸的提取工艺，为普生小球藻大规模高密度培养及其脂肪酸的工业化生产提供了一定的理论依据，为利用普生小球藻生产脂肪酸提供里技术支撑。

目录

摘要

1 绪论

1．1 引言

1．2 普生小球藻

1．2．1 普生小球藻简介

1．2．2 普生小球藻应用

1．2．3 普生小球藻营养价值

1．2．4 普生小球藻药用价值

1．2．5 普生小球藻培养方式

1．3 普生小球藻脂肪酸

1．3．1 脂肪酸简介

1．3．2 脂肪酸主要用途

1．3．3 油脂工业发展现状

1．4 本研究目的及意义

2 普生小球藻培养条件的优化

2．1 实验部分

2．1．1 主要仪器

2．1．2 主要试剂

2．1．3 藻种选择

2．1．4 培养基选择

2．1．5 小球藻培养

2．1．6 培养基尿素、KH2PO4比例优化

2．1．7 培养基pH值优化

2．1．8 培养温度的优化

2．1．9 转基因普生小球藻脂肪酸含量测定

2．2 结果与讨论

2．2．1 转基因普生小球藻培养

2．2．2 培养基中尿素、KH2PO4比例对转基因普生小球藻生长的影响

2．2．3 培养基pH值对转基因普生小球藻生长的影响

2．2．4 培养温度对转基因普生小球藻的影响

2．2．5 转基因普生小球藻脂肪酸含量测定结果

2．2．6 讨论

2．3 本章小结

3 普生小球藻脂肪酸提取工艺优化

3．1 实验部分

3．1．1 普生小球藻藻粉的制备

3．1．2 几种提取普生小球藻粗脂肪酸方法的比较

3．1．3 氯仿-甲醇法中不同溶剂用量对提粗脂肪酸得率的影响

3．1．4 分步提取对粗脂肪酸得率的影响

3．1．5 提取温度对粗脂肪酸得率的影响

3．1．6 脂肪酸提取量的测定

3．1．7 转基因普生小球藻中几种脂肪酸含量的测定

3．2 结果与讨论

3．2．1 转基因普生小球藻藻粉制备结果

3．2．2 转基因普生小球藻粗脂肪酸提取方法比较结果

3．2．3 氯仿-甲醇法中不同溶剂用量对提粗脂肪酸得率的影响

3．2．4 分步提取对粗脂肪酸得率的影响

3．2．5 提取温度对粗脂肪酸得率的影响

3．2．6 脂肪酸提取量

3．2．7 脂肪酸检测结果

3．2．8 讨论

3．3 本章小结

结论

参考文献

攻读学位期间发表的学术论文

致谢

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