ABA对悬浮培养匍枝筋骨草蜕皮激素的影响

摘要

本文实验在匍枝筋骨草悬浮培养体系建立的基础上进行研究，分别向已培养7d的体系中添加不同浓度的脱落酸（ABA），根据悬浮细胞的生长状况、生物量以及蜕皮激素含量，筛选出最适宜添加浓度；分析ABA对匍枝筋骨草悬浮细胞内防御酶活性的影响、细胞内源激素以及中间产物的含量变化；并利用Illumina技术进行了转录组测序分析，了解匍枝筋骨草悬浮细包经ABA处理后的差异基因表达情况。通过生理生化实验以及ABA对匍枝筋骨草悬浮细胞分子应答情况，探讨匍枝筋骨草悬浮细胞生长的影响。
　　结果表明：添加0.15mg/LABA后细胞在未褐化期，培养液中糖的消耗量增加，蜕皮激素（20E）及蜕皮激素合成途径中间产物甲羟戊酸和角鲨烯的含量均有所上升；添加ABA后细胞内防御酶CAT、POD、SOD活性上升；添加ABA后细胞内的ZR、IAA、GA3含量呈下降趋势，而ABA含量呈升高趋势；经ABA处理后匍枝筋骨草细胞共154个基因表达有显著差异，上调表达的基因有99个，下调表达的基因有55个。与蜕皮激素合成相关的 ko00900萜类合成主干通路有6个基因差异表达，ko00100甾体合成通路有4个基因差异表达，ko00140甾体激素生物合成通路有6个基因差异表达：在添加ABA后的第4d时悬浮细胞出现了褐化现象。

目录

1绪论

1.1有关匍枝筋骨草20E研究进展

1.2 ABA对植物影响概述

1.3 20E合成途径概述

1.4植物内源激素对植物细胞生长发育的影响

1.5转录组学技术在植物次生代谢物研究中的应用

1.6本文的目的和主要内容

2 ABA对匍枝筋骨草蜕皮激素及中间产物的影响

2.1材料与试剂

2.2实验方法

2.3实验结果

2.4本章小结

3 ABA对匍枝筋骨草防御酶活性的影响

3.1主要试剂及仪器设备

3.2实验方法

3.3实验结果

3.4本章讨论

4 ABA对匍枝筋骨草悬浮细胞内源激素的影响

4.1主要试剂及仪器设备

4.2实验方法

4.3实验结果

4.4本章讨论

5转录组基因表达分析

5.1 材料与试剂

5.2实验方法

5.3实验结果

5.4本章小结

6差异表达基因分析

6.1材料与试剂

6.2实验方法

6.3实验结果

6.4本章讨论

结论

参考文献

攻读学位期间发表的学术论文

致谢

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