胃癌、癌旁和正常组织端粒长度的变化

摘要

端粒长短和稳定性决定了细胞寿命,并与细胞衰老和癌变密切相关.随着肿瘤学在分子水平研究的深入,对端粒的研究越来越受到重视.已往对端粒酶活性与恶性肿瘤的关系研究较多,而对于端粒长度与恶性肿瘤临床病理参数的关系至今缺乏共识.该研究主要采用DNA Southern杂交技术分析胃癌、癌旁和正常组织端粒长度的变化,并探讨胃癌组织端粒长度变化与临床病理参数的相关性.材料和方法:1. 32例新鲜胃癌手术标本,含相应的癌组织、癌旁组织和正常组织.组织标本中加入DNA裂解液,经蛋白酶K消化,酚-氯仿法抽提DNA.用分光光度法测定DNA浓度和纯度.2.用限制性内切酶Hinf I消化基因组DNA.3.采用地高辛随机引物法标记裸DNA探针,应用DNA斑点杂交法检测探针的灵敏度和最适工作浓度.4.酶切后的基因组DNA用λ-HindⅢ digest DNA作为分子量标记,在0.6﹪的琼脂糖凝胶中电泳分离;电泳后的琼脂糖凝胶经变性、中和等处理后将DNA用Southern转印法转移到尼龙膜上;高温烤膜固定DNA;固定后的尼龙膜与标记后的探针在杂交袋中共孵育,42℃预杂交、杂交.5.杂交后的尼龙膜洗膜后,用BCIP/NBT显色并对杂交弥散带进行光密度扫描分析,取扫描主峰位置与分子量标记比较后,计算得出平均末端限制片段(TRFs),作为平均端粒长度.6.统计学处理:应用SPSS10.0统计软件进行统计学处理.组织DNA平均端粒长度用均数±标准差(x±S)表示,采用χ<'2>检验、t检验、K-W检验和直线回归分析.检验标准以P<0.05为差异有显著性,P<0.01差异有高度显著性.结论:1.正常胃黏膜组织端粒长度与供体年龄呈负相关.2.按正常胃黏膜-癌旁-胃癌的顺序端粒长度明显缩短.3.胃癌端粒长度缩短与临床病理指标无显著相关性.

目录

前 言

材料与方法

结 果

附 图

讨 论

结 论

参考文献

端粒、端粒酶与胃癌

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