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鸡Ⅱ型胶原建立豚鼠自身免疫性内耳病的实验研究

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综述 内耳免疫应答机制及免疫性内耳病

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摘要

背景与目的:为了明确Ⅱ型胶原是否在AIED发病中起关键作用,以及研究模型建立初期ICAM-1的表达情况,该实验用鸡Ⅱ型胶原建立豚鼠自身免疫性内耳病模型,用免疫组织化学技术观察模型建立初期ICAM-1的表达情况,并从功能、形态方面评价动物模型的内耳损伤情况.材料与方法:选用耳廓反射灵敏,体重150-200克纯白红目豚鼠65只,雌雄不限,随机分为以下三组:Ⅰ组:对照组(10只,20耳),不施加任何因素,与Ⅲ组相同时间点各处死5只;Ⅱ组:佐剂组(15只,死亡1只,28耳),首次皮下注射完全弗氏佐剂(complete Freundadjuvant,CFA)0.1ml,以后每周皮下注射1次0.1ml不完全弗氏佐剂(incomplete Freundadjuvant,IFA),共注射6次,分别于末次注射后第3天和2周处死7只;Ⅲ组:实验组(40只,死亡3只),首次皮下注射鸡Ⅱ型胶原(400μ g)与CFA的乳浊液0.1ml,以后每周皮下注射1次鸡Ⅱ型胶原(200μ g)与IFA的乳浊液0.1ml,共注射6次,末次注射后3天和2周分别处死19只、18只.各组动物均在处死前测定ABR.测试每只豚鼠两耳的ABR阈值、各波潜伏期及Ⅰ-Ⅲ波波间期,以70 dBSPL刺激强度所得出的各测试参量进行统计学分析.处死后Ⅰ组和Ⅱ组均用2只(4耳)作扫描电镜观察,Ⅲ组用5只(10耳)作扫描电镜观察,剩余动物内耳作石蜡包块供免疫组织化学测ICAM-1的表达以及HE染色观察.实验数据用SPSS10.0软件处理.结论:1.鸡Ⅱ型胶原可以诱发豚鼠产生自身免疫性内耳病.2.自身免疫性内耳病发病机制中Ⅱ型胶原起一定作用,但存在种系和个体差异.3.自身免疫性内耳病发病初期炎症因子ICAM-1起重要作用,其可能是此病的发病机制之一.4.鸡Ⅱ型胶原诱发豚鼠产生自身免疫性内耳病,可以引起豚鼠内耳形态结构和听觉功能的损伤.5.该实验为临床研究自身免疫性内耳病提供了一些实验依据.

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