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丹参硬膜外腔注射对髓核移植大鼠疼痛的影响

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引言

第一部分硬膜外腔植入异体髓核对大鼠痛阈及脊髓背根神经节SP和CGRP表达的影响

材料和方法

结果

讨论

结论

第二部分丹参注射液硬膜外腔注射对硬膜外腔移植异体髓核大鼠脊髓背角SP和CGRP表达的影响

材料和方法

讨论

结论

参考文献

椎间盘源性疼痛的机制研究

缩略语表

硕士研究生期间发表的论文

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摘要

目的 本研究运用异体髓核植入大鼠硬膜外腔,观察不同时间大鼠对各种伤害性刺激的反应,并采用免疫组织化学染色方法观察脊髓背根神经节细胞SP和CGRP的表达,以期为椎间盘源性疼痛发生机制提供理论依据。通过硬膜外腔注入自体尾椎髓核匀浆,观察术后硬膜外腔及神经根周围免疫炎症反应,并通过硬膜外腔置管注入中药丹参注射液14天,观察不同时间大鼠对各种伤害性刺激的反应,并采用免疫组织化学染色方法观察脊髓背角、背根神经节细胞SP和CGRP的表达,观察研究其对椎间盘突出症的治疗作用、安全性及其可能机制;以期为椎间盘源性疼痛发病机制和治疗机制提供细胞生物学基础。 方法 1.选择SD雄性大鼠24只(体重260-280 g),随机分4组,正常对照组、假手术组、脂肪组、和髓核组,每组6只。另外3只雄性SD大鼠用来提供异体脂肪和髓核。假手术组硬膜外腔无植入物植入,脂肪组植入异体大鼠腹膜外脂肪(约3.0~4.0 mg),髓核组硬膜外腔植入尾椎髓核(约3.0~4.Omg)。在术前、术后3,7,15,30 d分别测定鼠尾对温度刺激(观察自浸入至出现甩尾的间期,即温度刺激甩尾潜伏期)及机械刺激(观察大鼠后肢足底Von Frey触针机械性刺激反应)的反应。术后第30天取L4-L6脊髓背根神经节和脊髓背角,采用免疫组织化学染色方法观察髓核对脊髓背角和背根神经节细胞肽类神经递质SP和CGRP表达的影响。 2.选择雄性SD大鼠24只(体重260-280 g),均硬膜外腔植入尾椎髓核(约3.0~4.0 mg)后硬膜外腔植管备用。随机分为四组:髓核+未用药组(WG),髓核+生理盐水组(SG),髓核+地塞米松组(MG);髓核+丹参组(DG),每组n=6。四组均硬膜外腔植管,术后第6天开始注药治疗,髓核+丹参组每日硬膜外腔注入丹参注射液50μl,髓核+地塞米松组每日硬膜外腔注入地塞米松注射液25u/50μl,髓核+生理盐水组每日硬膜外腔注入生理盐水50μl,未注药组硬膜外腔无药物注入处理。在术前、术后每天分别测定各组大鼠机械刺激(观察大鼠后肢足底Von Frey触针机械性刺激反应)的反应。连续用药14天后第15天取L4-L6脊髓背根神经节和脊髓背角,采用兔疫组织化学染色方法观察髓核对脊髓背角和背根神经节细胞肽类神经递质SP和CGRP表达的影响。 结果 1.术后假手术组和脂肪组大鼠对温度刺激及机械刺激的痛阈与术前比较差异无显著性(P>0.05);而髓核组在硬膜外腔植入异体髓核5天后对机械刺激和温度刺激均表现为痛觉过敏(P<0.05);术后30天脂肪组大鼠与假手术组相比,脊髓背角和背根神经节细胞SP和CGRP表达没有显著性差异(p>0.05);髓核组与脂肪组和假手术组相比脊髓背角和背根神经节纽胞SP和CGRP表达显著增加(p<0.05)。 2.WG组(髓核+未用药组)与SG组(髓核+生理盐水组)、MG组(髓核+地塞米松组)、DG组(髓核+丹参组)在术后1-5天内对机械刺激均产生明显的痛觉过敏,于术前比较差异有统计学意义(P<0.05);用药14天后WG组(髓核+未用药组)与SG组(髓核+生理盐水组)、MG组(髓核+地塞米松组)、DG组(髓核+丹参组)相比背根神经节细胞SP和CGRP表达显著增加(p<0.05);DG组大鼠与MG组相比,背根神经节细胞SP和CGRP表达没有显著性差异(p>0.05);SG组大鼠与DG组、MG组相比,背根神经节细胞SP和CGRP表达有增加,但没有统计学意义(p>0.05)。 结论 1.大鼠硬膜外腔注入异体髓核组织可造成大鼠痛觉过敏;硬膜外腔植入异体髓核可引起脊髓背角和背根神经节细胞SP和CGRP表达增加。这可能是椎间盘突出引起根性神经痛的原因之一。 2.硬膜外腔注射丹参注射液或地塞米松注射液或生理盐水可改善硬膜外腔移植异体髓核大鼠的痛觉过敏;可降低硬膜外腔移植异体髓核大鼠脊髓背角和背根神经节细胞SP和CGRP表达增加。这可能是治疗椎间盘突出引起根性神经痛的细胞生物学基础。

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