嗅觉剥夺诱导触觉功能上调和抑制性神经网络的可塑性

摘要

目的：建立嗅觉剥夺诱导触觉功能上调和大脑桶状皮层（barrel cortex）GABA能神经元形态和功能改变的实验动物模型，研究跨感觉模式可塑性的机理，尤其是抑制性神经网络在神经可塑性中的作用。
　　方法：选用出生后12天和30天FVB-Tg（Gad GFP)4570Swn/J小鼠，予氯仿40ul滴入小鼠一侧鼻腔破坏一侧嗅觉，分别于嗅觉剥夺后1周和3周，取脑组织对barrel cortexGABA能神经元进行形态和功能检测。
　　1．以戊巴比妥钠麻醉，4％多聚甲醛心脏灌流固定，取脑放于4％多聚甲醛溶液固定，做成40μm连续楔形切片。切片放入反应液进行细胞色素氧化酶染色和尼氏复染，在光学显微镜下观察细胞色素氧化酶高活性神经元分布区域并进行细胞计数。部分切片直接在共聚焦显微镜下观察绿色荧光蛋白标记的GABA能神经元的形态结构。
　　2．选用生后12天FVB-Tg（Gad GFP)4570Swn/J小鼠，在嗅觉剥夺后1周用异氟烷吸入麻醉，迅速将大脑分离，做冠状切片（400μm）。将脑片放置于充分氧合的25?C人工脑脊液中，孵育1-2小时后转移至灌流槽，然后放入31?C人工脑脊液中，以2ml/min的速度灌流脑片。运用Axoclamp-2B放大器全细胞记录模式记录GABA能神经元动作电位的阈电位和不应期；用Clamp9软件分析群集发放的动作电位间距和动作电位峰时程标准差。
　　结果：与对照组相比，嗅觉剥夺使得barrel cortex细胞色素氧化酶高活性神经元的数量增加(P<0.05)，GABA能神经元突起的密度增加(P<0.05)，群集动作电位容量增加可能与不应期缩短(P<0.05)和阈电位降低有关(P<0.05)。
　　结论：嗅觉剥夺诱导触觉功能上调和大脑桶状皮层（barrel cortex）GABA能神经元形态和功能增强，提示抑制性神经网络可能是参与跨感觉模式可塑性的机理。

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引言

材料与方法

1 材料与仪器

2 实验方法

3 统计学处理

结果

1 嗅觉剥夺诱导触可塑性行为学依据

2 抑制性网络细胞机制

3 Barrel cortex GABA 能神经元电生理功能检测

讨论

结论

参考文献

致谢

附录A英语缩略语对照表

附录B常用试剂配制

附录C个人简历及发表论文

附录D 综述: 主体感皮层突触可塑性的研究进展