美金刚对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡蛋白酶3,丙二醛的影响

摘要

背景:
　　 缺血性脑卒中是神经系统的常见多发病,随着溶栓、介入等诊疗技术的开展,缺血再灌注所带来继发性损伤凋亡逐渐得到重视,抑制缺血半暗区神经细胞迟发性损伤成为治疗的目标,非竞争性N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体拮抗剂美金刚,已频繁用于帕金森病、老年痴呆、痉挛性疾病及病毒感染性疾病的治疗,且无严重的毒副作用。该药对于缺血的研究,集中于抑制兴奋性氨基酸及钙离子内流作用机制上,阻止缺血再灌注所继发的迟发性损伤机制仍需进一步探究。抑制细胞凋亡蛋白酶3(天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3)(cystein-containing aspartate-specific protease-3,caspase3)反应活性阻止细胞凋亡,以及抗膜脂质过氧化保护膜脂质稳定性是又一可能的作用机制。本研究通过建立大鼠脑缺血再灌注模型,观察美金刚对大鼠脑皮质神经元Caspase-3表达和丙二醛(malonaldehyde,MDA)生成含量的影响,了解 NMDA受体拮抗剂的神经保护作用机制。
　　 目的:
　　 观察非竞争性NMDA受体拮抗剂对大鼠脑缺血再灌注后迟发性脑损伤的作用,探讨NMDA受体拮抗剂对缺血再灌注神经元细胞的作用机制,为临床应用提供理论和实验依据。
　　 方法:
　　 雄性 Wister大鼠135只,随机分为假手术组、缺血模型组及美金刚干预组,采用线栓法(thread occlusion of the middle cerebral artery),建立大鼠大脑中动脉闭塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型,用美金刚溶液灌胃,HE(hematoxylin-eosin,伊红)染色观察大鼠脑神经元形态变化,免疫组化染色检测神经元Caspase-3的表达变化,分光光度计检测其Caspase-3酶活力单位、MDA含量变化。
　　 结果:
　　 假手术组、缺血模型组及美金刚干预组的caspase-3阳性区平均积分光密度,caspase-3酶活力单位,MDA生成含量差异有统计学意义。美金刚干预组Caspase-3酶活力单位表达及MDA生成含量较模型组明显降低,而高于假手术组,差异具有统计学意义(P<0.05)。
　　 结论:
　　 非竞争性NMDA受体拮抗剂美金刚可下调大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3表达及MDA生成含量,阻止迟发性脑损伤而发挥神经保护作用。