HIF-1α、STAT3及Survivin在鼻息肉中的表达及意义

摘要

背景与目的：鼻息肉是鼻科临床的一种常见疾病,为发源于鼻窦(普遍是在鼻窦的一个或多个流出道)黏膜或鼻腔黏膜的良性病变,其病因和发病机制尚不明确,但据我们所知,鼻息肉的发病与过敏、哮喘、感染、囊性纤维化、阿斯匹林的敏感性相关。多数研究认为鼻息肉的形成中有多种因素的共同作用。近来的研究倾向于关注多种细胞因子在鼻息肉发病的始动与发展过程中的作用。最近,有研究者认为鼻息肉的发病过程是细胞增殖与凋亡失衡的过程,较多关于鼻息肉的研究文献中报告了细胞凋亡过程的异常,称多种细胞因子异常表达与之相关。研究缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、信号转导及转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription3,STAT3)及生存素(Survivin)在鼻息肉组织中的表达以及三者在鼻息肉发生、发展过程中的可能作用及三者间的相关性。
　　 材料与方法：
　　 1.临床材料
　　 选取25例经鼻内窥镜手术切除的鼻息肉标本为实验组,及同期单纯行鼻中隔偏曲矫正术中部分切除的肥厚下鼻甲黏膜组织15例为对照组。25例鼻息肉标本取材于2009-2011年在郑州大学第一附属医院鼻科接受鼻内窥镜手术的患者。鼻息肉标本(实验组):单侧或双侧鼻窦CT检查阳性,鼻内窥镜检查或术中发现息肉样组织,并排除变应性鼻炎、哮喘及全身疾病史,。其中男12例,女13例:年龄17-62岁不等。平均年龄(43.25±5.45)岁。15例正常下鼻甲黏膜组织(对照组):取自同一时期鼻内窥镜手术治疗的鼻中隔偏曲患者代偿肥大之部分下鼻甲,并排除慢性鼻炎一鼻窦炎、变应性疾病及全身疾病史,其中男8例,女7例;年龄17-46岁,平均年龄(30.5±6.32)岁。所有研究对象临床病例资料完整,术前1个月均未使用免疫抑制剂、激素类以及抗组胺类药物。标本均于手术中取材,用10％中性福尔马林固定,石蜡包埋,4μ m连续切片。
　　 2.实验方法:
　　 对25例鼻息肉组织标本及15例下鼻甲粘膜组织标本行HE染色,并用免疫组化SP法对标本进行HIF-1α、STAT3及Survivin检测。
　　 3.结果判定标准:
　　 采用已知阳性片作阳性对照,利用PBS代替一抗作阴性对照,排除非特异性染色干扰。每组织切片选取10个高倍视野,以胞质和/或胞核呈现土黄色或棕褐色颗粒为阳性染色细胞,合并计算各视野内阳性细胞百分比及染色强度并对其分级,取其级数平均数,用双盲法进行判断,由两个独立观察者分别评分。
　　 4.统计学处理:
　　 应用SPSS17.0统计软件分析数据,组间比较采用Fisher双侧检验,相关性分析应用Spearman相关分析,均以P<0.01为差异具有统计学意义。
　　 结果：
　　 1.光镜下见,HE染色的鼻息肉组织切片中细胞浆染色淡粉色或淡红色,细胞核染色为蓝色或蓝黑色。鼻息肉组织中含过度水肿的疏松结缔组织,伴随大量杯状细胞增生,腺体组织过度增生,多呈囊性扩张或长管状。较多炎性细胞浸润分布于细胞间质中,如嗜酸性粒细胞、肥大细胞等,以嗜酸性粒细胞为著。鼻息肉组织中可见新生血管,无神经组织,基底膜一般情况下增厚。而对应的下鼻甲粘膜组织中未发现杯状细胞及腺体组织过度增生,腺管一般多为圆形,少见炎性细胞浸润,嗜酸性粒细胞也极少,与鼻息肉组织形成鲜明对比。
　　 2.HIF-1α阳性信号主要定位于细胞浆和/或细胞核,染色呈土黄色、棕黄色染色颗粒,少数染为棕褐色;光镜下可见阳性细胞多分布在鼻息肉黏膜上皮、腺体、血管内皮等,基质中也可见到HIF-1α阳性信号。STAT3阳性信号则主要分布于细胞浆中,少数在细胞核,染色多为土黄色或棕黄色,少数呈棕褐色;阳性信号多分布于鼻息肉黏膜上皮细胞及腺体细胞等,也分布于基质中。Survivin在鼻息肉中表达于细胞质内,很少定位于胞核,主要表达于鼻息肉组织表面黏膜上皮细胞、黏膜下腺体内皮细胞以及炎性细胞,呈土黄色或棕黄色。
　　 HIF-1α、STAT3及Survivin在鼻息肉黏膜上皮及腺体的表达的例数分别为19、17、16例,阳性率分别为76%、68%、64%,均明显高于对照组,与下鼻甲粘膜组织标本对照组的差异均具有显著性(P<0.01)。②鼻息肉组中,HIF-1α蛋白阳性表达的19例中有16例同时是STAT3蛋白阳性表达,另有16例是Survivin蛋白阳性表达;17例STAT3蛋白阳性表达中,有15例同时是Survivin蛋白阳性表达。对其进行统计学分析,HIF-1α与STAT3、HIF-1α与Survivin及STAT3与Survivin之间在表达强度上均呈正相关(P<0.01)。
　　 结论：HIF-1α、STAT3及Survivin在鼻息肉中黏膜上皮及腺体的表达明显高于下鼻甲黏膜组织,且三者表达水平之间存在正相关联系。表明HIF-1α、STAT3及Survivin与鼻息肉发生发展的过程有关,与鼻息肉病变组织内缺氧环境适应以及细胞增殖、凋亡平衡失衡有关,且三者间可能是相互协同的作用,共同促进。