血管紧张素1/酪氨酸激酶受体2系统与门静脉高压症大鼠模型食管壁新生血管形成关系的实验研究

摘要

目的：
　　通过制备门静脉高压症（portal hypertension,PHT）大鼠模型，探讨血管生成素1（angiopoietin-1，Ang-1）/酪氨酸激酶受体2(tyrosine kinase receptors2，Tie-2)系统在PHT大鼠食管壁组织的表达情况及其与食管壁新生血管形成的关系。
　　方法：
　　50只健康雄性SD大鼠，平均体重300±20g，随机选取30只作为实验组，另20只作为对照组。实验组应用“门静脉部分结扎+左肾上腺静脉结扎法”建立PHT大鼠模型，对照组开腹后仅分离门静脉及左肾上腺静脉而不结扎。模型建立2周后取大鼠食管下段标本，应用免疫组化技术检测食管壁组织Ang-1、Tie-2的表达水平，应用抗CD34抗体进行血管免疫组织化学染色，并使用计算机图像分析系统对大鼠食管壁组织中微血管进行标记，计数微血管密度（microvessel density，MVD）。应用统计学软件分析两组大鼠食管壁组织Ang-1、Tie-2的表达水平差异，并分析Ang-1、Tie-2的表达与MVD的相关性。
　　结果：
　　共37只大鼠模型建立成功（其中实验组17只，对照组20只）。取大鼠食管壁组织时腹腔探查可见：实验组大鼠腹腔粘连，有大量淡黄色腹水产生（5-10ml）。肝脏、胃肠道及脾脏呈淤血水肿改变，脾脏颜色变深、体积变大，食管壁、胃壁及大网膜可见明显曲张静脉形成。对照组大鼠腹腔除粘连外无其它明显异常。HE染色大鼠食管壁组织后观察可见：实验组大鼠食管壁粘膜层呈淤血水肿改变，粘膜层增厚并部分静脉明显迂曲、扩张，曲张静脉内可见大量红细胞，粘膜层及粘膜下可见炎性细胞浸润。对照组大鼠食管壁无上述改变。免疫组化结果显示，实验组大鼠食管壁组织中Ang-1和Tie-2蛋白的表达水平分别是128.97±4.64和62.83±3.20，明显高于其在对照组中的表达（62.83±3.20、68.33±5.90），差异有统计学意义（P<0.05）。MVD计数分析显示，实验组大鼠食管壁组织中MVD为13.83±5.10，明显高于对照组MVD（7.65±3.49），差异有统计学意义（P<0.05）。相关性分析显示，实验组大鼠食管壁组织中Ang-1蛋白的表达水平与MVD无明显相关性（r=0.39，P>0.05），而Tie-2蛋白的表达水平与MVD成正相关（r=0.71，P<0.05）。
　　结论：
　　PHT大鼠模型食管壁组织存在活跃的新生血管形成，食管壁组织中Ang-1、Tie-2蛋白的表达水平及MVD均明显增高。Tie-2的激活可能与PHT大鼠模型食管壁组织的新生血管形成有关。

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中英文缩略词对照

前言

资料与方法

1 实验资料

1.1 动物资料

1.2 主要实验药品及试剂

1.3 主要仪器及器械

1.4 主要试剂的配置

2 实验方法

2.1 研究对象与分组

2.2 PHT大鼠模型的建立

2.3 大鼠食管下段病理切片检查

3 统计学方法

结果

1 模型的建立

2 PHT大鼠模型食管壁组织病理观察

3 实验组和对照组大鼠食管壁组织中 Ang-1、Tie-2 的表达情况及MVD

4 实验组食管下段Ang-1、Tie-2的表达与MVD的相关性

讨论

1 构建PHT大鼠模型的选择

2 PHT脏器组织中新生血管的形成和促血管生长因子的表达情况

3 Ang-1/Tie-2系统在PHT大鼠模型食管壁组织中的表达及其与食管壁新生血管形成的关系

结论

参考文献

综述 抗新生血管治疗在PHT中的应用

个人简历

致谢