NT-3及神经干细胞联合移植治疗缺氧缺血性脑损伤的实验研究

摘要

目的：1.建立稳定的神经干细胞(NSCs)分离培养体系。 2.研究神经营养素-3(NT-3)及NSCs联合移植对缺氧缺血性脑病(HIE)大鼠神经功能恢复及NT-3对移植NSCs分化的影响，并探讨其可能机制。 方法：取新生24小时内的wistar大鼠，从海马中分离神经细胞，进行培养、鉴定。用出生7目龄的wistar大鼠制作缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的动物模型，7天后进行移植。将实验大鼠随即分为5组：正常组、模型组、假移植组、NSCs移植组、NT-3及NSCs联合移植组，每组12只。移植部位为损伤同侧侧脑室。4周后进行功能实验，取脑组织进行免疫组化及免疫荧光检查。 结果：从新生鼠海马中成功培养出NSCs，培养条件下呈悬浮状态生长，形成神经球，绝大多数的细胞表达NSCs的标志物神经巢蛋白(nestin)。NT-3及NSCs移植组大鼠的学习能力、记忆能力及肢体功能与NSCs移植组相比有明显提高，差异具有显著性(p＜0.05)。其NSCs分化成神经元的比例与NSCs移植组比有明显增多。 结论：从新生大鼠的海马呵以分离培养出NSCs。NSCs经侧脑室移植后可以在大脑中存活、迁移、分化。NT-3与NSCs联合移植能提高HIBD大鼠的学习、记忆能力和肢体功能，并促进神经干细胞存活及向神经元转化，NT-3和NSCs联合移植较单独NSCs移植对HIBD有更好的治疗效果。

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