宫颈鳞状细胞癌病理未转移淋巴结中HPV-DNA分型检测及其与预后的关系

摘要

背景及目的：
　　目前，宫颈癌仍是全球范围内影响女性生殖健康的最常见恶性肿瘤之一。高危型人乳头瘤病毒（Human Papilloma Virus，HPV）的持续感染是其发生发展的必要条件。近年来，在发达国家，随着宫颈病变筛查机制的有效普及和HPV疫苗的应用，许多患者得以早期发现和合理治疗，使得宫颈癌的发病率及死亡率有所下降。然而，在发展中国家，其仍是威胁女性生命的第二位恶性肿瘤。手术治疗是早期宫颈癌的主要治疗手段。淋巴转移是宫颈癌最常见的转移方式，是影响临床疗效及远期预后的独立危险因素。然而一些研究表明，即便是术后病理未发现淋巴结转移的患者，复发率仍高达10％-15%。近年来，随着免疫学及分子生物学的发展，微转移的概念出现并逐渐建立起来成为研究热点。淋巴结微转移检测的价值在于有助于准确的临床分期及判断预后，有利于制定个体化、针对性的治疗方案，从而改善患者预后、提高临床疗效。
　　淋巴结微转移的检测在多种肿瘤的研究中显示出较好的临床应用价值。有研究表明，盆腔淋巴结中检出HPV阳性早于组织病理学出现转移，且有淋巴结微转移的患者临床预后较差。因此，我们推测，淋巴结中HPV-DNA可能为早期微转移的指标。本研究对宫颈鳞状细胞癌患者术后常规病理未转移的淋巴结进行HPV-DNA分型检测，探讨病理未转移淋巴结中HPV-DNA阳性的意义及其与预后的关系。
　　方法：
　　选取2010.01.01-2014.12.31期间因确诊宫颈鳞状细胞癌于郑州大学第二附属医院住院，并行广泛性子宫全切+盆腔淋巴结清扫术的患者，临床分期IB1~IIA2期，原发病灶均为HPV阳性，病历资料均完整。共入组36例，其中淋巴结未转移组20例，淋巴结转移组16例。对淋巴结未转移者，选取原发灶及未转移淋巴结组织蜡块；对淋巴结转移者，选取原发灶及转移淋巴结组织蜡块，分别进行HPV-DNA分型检测，得出不同淋巴结组HPV-DNA的感染率及型别。完善随访资料，结合入组患者年龄、临床分期、肿瘤直径、病理发现等一般资料，分析未转移淋巴结中HPV-DNA的检测情况及其与预后的关系。
　　结果：
　　1.与淋巴结未转移组相比，淋巴结转移组肿瘤直径较大（≥4cm）患者的比例更高，肿瘤直径≥4cm时淋巴结转移的风险大。两组间在年龄、孕产次、BMI、临床分期、组织学分级及宫颈肌层浸润深度方面无差异。
　　2.36例宫颈鳞癌患者，淋巴结中HPV-DNA的阳性率为66.67%（24/36）。16例淋巴结转移者，80.95%（17/21）的淋巴结检测到HPV-DNA；20例无淋巴结转移者，33.33%（20/60）的淋巴结HPV-DNA阳性。淋巴结转移组转移淋巴结HPV-DNA阳性型别均为16型，淋巴结未转移组未转移淋巴结HPV-DNA阳性型别中90%（18/20）为16亚型；淋巴结中HPV-DNA阳性型别均与原发灶型别一致。宫旁组织，闭孔、髂内组，髂外、腹股沟组，髂总、腹主组HPV-DNA阳性率分别为77.78%（7/9）、45%（9/20）、30%（6/20）、25%（5/20）。
　　3.淋巴结HPV-DNA阳性组24例，阴性组12例，两组间肿瘤直径、脉管颈管浸润方面有显著差异，临床分期、年龄、组织学分级、宫颈肌层浸润深度、有无淋巴结转移方面的差异无统计学意义。肿瘤直径＜4cm、合并脉管间质浸润的宫颈鳞癌患者淋巴结HPV-DNA阳性率高。颈管、脉管浸润是淋巴结中检测到HPV-DNA阳性的独立危险因素，OR值为6.385，95%置信区间为（1.059,38.504）。
　　4.36例宫颈癌患者，随访平均时间（32.47±15.22）月。8.33%（3/36）的患者在随访过程中死亡，其中，1例淋巴结HPV-DNA阴性，2例阳性。16.67%（6/36）复发，其中淋巴结HPV-DNA阳性者3例，阴性3例。总体生存期的Kaplan-Meier生存分析，HPV-DNA阳性组平均OS（28.87±2.81）月，阴性组平均OS（42.6±4.84）月，两组间生存曲线间差异显著，HPV-DNA阳性组生存期短于阴性组。无瘤生存期的Kaplan-Meier生存分析，HPV-DNA阳性组平均DFS（32.15±3.11）月，阴性组平均DFS（44.35±4.77）月，两组间无瘤生存曲线差异显著，HPV-DNA阳性组无瘤生存期短于阴性组。
　　结论：
　　1.宫颈鳞癌淋巴结中HPV-DNA阳性率以闭孔、髂内组最高。
　　2.原发灶HPV16型阳性、肿瘤直径＜4cm、合并颈管脉管浸润及淋巴结转移的宫颈鳞癌患者更容易出现淋巴结HPV-DNA阳性，颈管脉管浸润是其独立危险因素。
　　3.宫颈鳞癌淋巴结中HPV-DNA阳性是预后不良的危险因素。
　　4. HPV-DNA分型检测可能成为宫颈鳞癌淋巴结微转移的检测指标。

目录

封面

声明

中文摘要

英文摘要

中英文缩略词对照表

目录

前言

1 材料与试剂

1.1 标本来源

1.2 实验仪器

1.3 实验试剂及耗材

2 实验方法

2.1标本收集

2.2 宫颈鳞癌原发灶及淋巴结中HPV-DNA的检测

2.3统计学处理

3 结果

3.1 患者一般资料

3.2 宫颈鳞癌淋巴结中HPV-DNA检测情况

3.3 淋巴结中HPV-DNA与临床病理特征的关系

3.4 淋巴结中HPV-DNA与预后的关系

4 讨论

4.1影响宫颈癌患者预后的因素

4.2 转移淋巴结及未转移淋巴结中HPV-DNA的检测

4.3 淋巴结中HPV-DNA表达与临床病理特征的关系

4.4淋巴结中HPV-DNA阳性组与阴性组的预后比较

5 结论

6 展望

参考文献

综述:宫颈癌淋巴结微转移的研究进展

个人简历及在学期间发表的学术论文与研究成果

致谢