兔下颌骨来源骨髓间充质干细胞体外分离培养及生物学行为的研究

摘要

目的：
　　探讨兔下颌骨来源的骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs）体外分离、培养及其生物学行为。
　　方法：
　　取兔下颌骨中的松质骨，密度梯度离心分离法收集单个核细胞，贴壁培养，取第P2或P3代检测：
　　（1）倒置显微镜下观察细胞生长状态；
　　（2）MTT法测定细胞增殖，测定的数据应用SPSS16.0进行统计学分析，绘制细胞生长增殖曲线；
　　（3）克隆形成实验计算克隆形成率；
　　（4）向成骨细胞、脂肪细胞、骨骼肌细胞诱导分化；
　　（5）流式细胞仪检测细胞表面抗原标志。
　　结果：
　　（1）细胞经传代后形态一致，呈梭形或三角形；
　　（2）细胞生长曲线显示下颌骨BMMSCs经历潜伏期、对数生长期和平台期，统计数据表明细胞1—7d生长增殖有统计学意义（P＜0.05）；
　　（3）集落形成实验克隆形成率37％；
　　（4）成骨诱导后形成钙结节，茜素红染色呈阳性；成脂诱导细胞核周围出现脂滴，油红O染色呈阳性；成骨骼肌细胞诱导 desmin抗原标记阳性；
　　（5）流式细胞仪检测结果显示所获得的下颌骨BMMSCs纯度较高，CD90和CD146表面标记阳性率分别为98.7%、98.1%。
　　结论：
　　兔下颌骨分离出的BMMSCs，纯度较高，有强大的自我复制及增殖能力，具有多向诱导分化的潜能。

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前言

文 献 综 述: 骨髓间充质干细胞体外分离培养及其在组织工程中的应用

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

致谢

英文缩写

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附图