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【6h】

长链非编码RNA HULC在眼眶弥漫性大B细胞淋巴瘤中的作用及机制研究

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摘要

中英文缩略词表

引言

第一部分HULC和miR-29c-5p在眼眶DLBCL中的表达情况

1前言

2实验材料

2.1标本采集

2.2实验试剂本

3实验方法

3.1 HE染色观察眼眶DLBCL的组织形态

3.2 qRT-PCR检测HULC和miR-29c-5p在眼眶DLBCL组织中的表达水平

3.3数据分析

4结果

4.1 HE染色观察眼眶DLBCL的组织形态

4.2 HULC在眼眶DLBCL组织中的表达情况

4.3 miR-29c-5p在眼眶DLBCL组织中的表达水平

5讨论

6结论

参考文献

第二部分HULC对DLBCL细胞生物学功能的影响及分子机制

1前言

2实验材料

2.1实验细胞

2.2实验试剂

2.3实验器材

2.4实验主要配制试剂

3实验方法

3.1构建HULC过表达慢病毒载体

3.2构建HULC敲除慢病毒载体

3.3构建miR-29c-5p过表达慢病毒载体

3.4细胞复苏、传代、冻存和培养

3.5重组慢病毒包装和滴定

3.6重组慢病毒感染Pfeiffer细胞

3.7 CCK-8实验检测Pfeiffer细胞增殖情况

3.8 Transwell小室检测Pfeiffer细胞侵袭情况

3.9流式细胞术检测Pfeiffer细胞凋亡情况

3.10 Western blot

3.11生物信息学预测能与HULC结合的miRNA

3.12 qRT-PCR

3.13双荧光素酶报告基因实验验证HULC能与miR-29c-5p相互结合

3.14数据分析

4结果

4.1 HULC过表达载体的构建

4.2 HULC敲除载体的构建

4.3 miR-29c-5p过表达载体的构建

4.4病毒包装和滴定结果

4.5稳定细胞系的构建

4.6稳定细胞Pfeiffer中HULC敲除的效率测定

4.7 HULC敲除对Pfeiffer细胞增殖的影响

4.8 HULC敲除对Pfeiffer细胞侵袭的影响

4.9 HULC敲除对Pfeiffer细胞凋亡的影响

4.10 HULC敲除对Pfeiffer细胞中MAPK/ERK信号通路的影响

4.11生物信息学预测能与HULC结合的miRNA

4.12 HULC在Pfeiffer细胞中的表达情况

4.13 miR-29c-5p在Pfeiffer细胞中的表达水平

4.14荧光素酶载体构建结果

4.15双荧光素酶报告基因实验

4.16 HULC对Pfeiffer细胞中miR-29c-5p表达的影响

4.19 HULC-miR-29c-5p axis对Pfeiffer细胞凋亡的影响

4.20 HULC-miR-29c-5p axis对Pfeiffer细胞中MAPK/ERK信号通路的影响

5讨论

6结论

参考文献

第三部分HULC对DLBCL移植瘤生长的影响及分子机制

1 前言

2实验材料

2.1实验动物

2.2实验细胞

2.3实验试剂

2.4实验器材

3实验方法

3.1构建移植瘤小鼠模型

3.2 qRT-PCR检测DLBCL移植瘤中HULC和miR-29c-5p的表达情况

3.3免疫组化检测DLBCL移植瘤中Ki67的表达情况

3.4 Western blot检测DLBCL移植瘤中MAPK/ERK信号通路相关蛋白

4结果

4.1 HULC敲除对DLBCL移植瘤生长的影响

4.2 HULC敲除对DLBCL移植瘤重量的影响

4.3 DLBCL移植瘤中HULC的表达情况

4.4 HULC敲除对DLBCL移植瘤中miR-29c-5p表达的影响

4.5 HULC敲除对DLBCL移植瘤中Ki67表达的影响

4.6 HULC敲除对DLBCL移植瘤中MAPK/ERK信号通路的影响

5讨论

6结论

参考文献

全文结论

展望

综述

个人简历及在学期间发表的学术论文与研究成果

致谢

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