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萼脊兰胚培养和快速繁殖技术

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1 文献综述

1.1 兰花概述

1.2 国内外兰花组织培养研究进展

1.3 国兰组织培养研究进展

1.3.1 中国兰组织培养中的形态建成

1.3.2 外植体的培养

1.4 萼脊兰的生物学特性及观赏价值

1.5 萼脊兰的组织培养研究现状

2 引言

3 试验材料和方法

3.1 试验材料

3.2 试验设计

3.2.1 预备试验

3.2.2 技术路线

3.3 实验方案

3.3.1 胚培养试验方案

3.3.2 继代培养试验方案

3.3.3 选择试管苗不同部位进行试验方案

3.3.4 瓶苗移栽

3.3.5 试验结果观测

3.3.6 数据统计方法

4 试验结果分析

4.1 胚培养

4.1.1 不同培养基对胚萌发影响

4.1.2 不同浓度的激素对萼脊兰胚萌发的影响

4.1.3 有机添加物对萼脊兰胚萌发的影响

4.1.4 活性炭对萼脊兰胚萌发的影响

4.2 继代培养

4.2.1 PLB增殖

4.2.2 PLB分化

4.3 成苗培养

4.4 取生根试管苗各部分为外植体的试验

4.5 炼苗移栽

5 结论与讨论

5.1 小结

5.2 讨论

5.2.1 无菌播种试验材料的选择

5.2.2 影响萼脊兰胚萌发的因素

5.2.3 萼脊兰原球茎的增殖和分化

5.2.4 萼脊兰两种再生植株方式的比较

5.2.5 试管苗的移栽

5.3 需要进一步开展的工作

参考文献

附图

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摘要

萼脊兰为兰科(Orchidaceae)萼脊兰属(Sedirea)植物,为国家二级保护植物。因其花色清丽,香味芬芳,观赏期长,养护简单且耐寒,故越来越受到人们的喜爱。 兰花的传统繁殖方法主要是将兰花分株繁殖,繁殖速度慢,不少品种在栽培条件下很少结种子。同时由于兰花的种子极小,且胚发育不完全,因此不易发芽,必须借助共生的菌类供给养料才能萌发。萼脊兰因其种子极为细小,胚未分化,不含胚乳,萌发率很低。随着组织培养技术的发展,利用无菌播种方式来繁殖,能使许多兰花种子发芽率大幅度提高。但国内还无人对萼脊兰进行组织培养方面的研究。为探索萼脊兰组织培养快速繁殖的有效途径,本文以以萼脊兰的胚为材料,研究了萼脊兰的组织培养和快速繁殖技术,着重研究其胚培养和原球茎增殖分化的最佳培养基配方及培养程序,建立萼脊兰快速繁殖技术体系。综合试验结果及分析,萼脊兰组织培养体系各环节技术要点如下: 1、胚培养:培养基中无机盐的浓度和激素影响胚的萌发,在1/4MS培养基加入0.5mg/L的KT效果最佳,培养80天,萌发率可达70%以上;培养基中加入椰子水、土豆提取物、蛋白胨和活性炭对胚的萌发均有明显的促进作用。 2、原球茎增殖:培养基为1/3MS+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L+椰子水10%+蛋白胨2g/L+活性炭2g/L+蔗糖20g/L+琼脂7g/L,年理论增殖系可达3.25×105。 3、原球茎分化:培养基为:1/3MS+6-BA10 mg/L+NAA0.5mg/L时分化率最高,平均每个外植体可分化出2.8个芽。 4、成苗阶段:促进苗生长的最适培养基为1/2MS+IAA0.2mg/L+6-BA6mg/L+AC1mg/L。促进根生长的最适培养基为1/2MS+IAA0.5mg/L++6-BA1mg/L+AC2mg/L。 5、(活性炭)AC对外植体褐变的防止有一定作用,浓度为2g/L在胚培养、PLB增殖阶效果最好。 6、小苗在苔藓基质中生长良好,成活率可达100%。

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