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分子标记在隐性白羽肉鸡新品系培育中的实践与应用

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摘要

1 文献综述

1.1 隐性白羽鸡的研究现状与应用

1.1.1 白羽性状的研究

1.1.2 隐性白羽鸡的现状

1.1.3 隐性白羽鸡在育种中的应用

1.2 遗传标记概述

1.2.1 形态标记

1.2.2 细胞学标记

1.2.3 生物化学标记

1.2.4 免疫学标记

1.2.5 分子标记

1.2.6 分子标记在育种中的应用

1.3 固始鸡

1.3.1 固始鸡的简介

1.3.2 固始鸡的羽色研究

1.4 本研究的目的意义与技术路线

1.4.1 目的意义

1.4.2 技术路线

2 引言

3 材料与方法

3.1 试验材料

3.1.1 试验动物及饲养管理

3.1.2 试验主要仪器设备

3.1.3 主要试剂及其配制

3.2 试验方法

3.2.1 血样的采集

3.2.2 种蛋的处理与孵化

3.2.3 基因组DNA提取

3.2.4 DNA浓度与纯度的检测

3.2.5 DNA琼脂糖凝胶电泳检测

3.2.6 PCR扩增

3.2.7 PCR产物的酶切体系

3.3 基因型鉴定

4 结果与分析

4.1 基因组DNA提取结果检测及判型

4.1.1 基因组DNA提取结果检测

4.1.2 显性自羽位点基因型分析

4.1.3 隐性白羽位点的基因型分析

4.2 分子标记在隐性自羽肉鸡新品系培育中的应用

4.3 分子标记在育种中的应用效果

4.3.1 自交群体验证

4.3.3 测交验证

5 讨论与结论

5.1 讨论

5.2 结论

参考文献

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摘要

在中国,禽肉的消费占极大的比重。现在随着集约化程度的不断提高,造成肉质风味下降,同时由于人为饮食观念从量到肉质与风味的转变。中国人具有喜爱活鸡的消费偏好,有色羽在很多地区得到人们的偏爱。家禽育种工作者现急需培育出肉质风味好,外貌特征符合消费者需求的品种。隐性白羽肉鸡新品系的培育,一方面能够使得商品代具备地方鸡的外貌特征,另一方面能够改善肉品质。本研究利用分子标记辅助选择育种技术加快白羽肉鸡新品系培育的进程,以期为培育优质鸡奠定基础。
  本研究根据前期实验室建立的显性白羽位点和隐性白羽位点的分子标记,以河南农业大学种鸡场培育的隐性白羽鸡为试验群体,利用基因分型技术选留纯合个体进行留种,应用于隐性白羽肉鸡新品系的培育实践;同时,结合测交群体和自交群体亲代和子代基因型和表现型的对比,评价分子标记在育种中的应用效果。
  在隐性白羽鸡群体中选取500只,翅静脉采血,提取DNA,采用分子标记对隐性白羽鸡控制白羽性状的I、C位点进行基因判型。根据基因型判定结果,选留隐性纯合个体(基因型为iicc),纯种繁育人工授精,收集15天内种蛋,观察F1代羽色情况,随机抽取F1代个体判定其I、C位点基因型。结果表明选留的白羽群体均为隐性纯合群体,纯繁F1代羽色均表现白羽,I、C位点基因型均为隐性纯合,选择准确率达到100%。
  随机选取基因型为隐性纯合个体(iicc)的白羽公鸡与已知基因型的白羽母鸡交配,人工受精,收集15天内的种蛋,个体孵化,统计F1代羽色并与理论值进行比较,确定基因型分析的可靠性;在自交群体验证中,其理论基因型均与标记判型结果相一致,羽色表现也与理论表型基本相符合,在后代基因型为IiCc的个体中有个别白羽黑斑,是由基因互作引起,后代基因型为iiCc有个别个体表型表现为白羽黑斑,饲养发现羽色有加深现象。
  选取固始公鸡12只与基因型为隐性纯合个体(iicc)母鸡60只测交和基因型为iicc的隐性白羽公鸡12与固始母鸡60只测交,公母比例为1∶5,单笼饲养,个体孵化,观察后代羽色分离情况观察并记录,测定对应固始母鸡I、C位点的基因型以及与父母本编号相对应的的测交后代I、C位点基因型。在测交群体验证中,标记判定基因型与理论基因型一致,测交F1代的表型性状与理论性状基本一致,在基因型为iiCc的群体中有少数个体出现白羽黑斑,饲养发现羽色有加深现象。
  试验结果表明:本研究将显性白羽和隐性白羽位点的分子标记应用于隐性白羽鸡新品系的培育,经过标记筛选后杂交后代的白羽比率达到99%;同时利用传统育种常用的测交方法对分子标记的结果进行效果评价,测交后代有色羽比率达到90%以上。正反交结果一致,说明控制白羽性状基冈位于常染色体上。本研究有效提高了选择效率,加快育种进程,为分子标记在隐性白羽肉鸡新品系中的实践和应用奠定了基础。

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