河南省部分地区猪伪狂犬病流行病学调查及综合防控措施研究

摘要

猪伪狂犬病(Pseudorabies，PR)是由猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus，PRV)引起的一种急性传染病，以母猪流产、死胎、木乃伊及仔猪死亡为特征，对养猪业危害极大。近几年来，我国一些猪场不断暴发和流行猪伪狂犬病，导致母猪大量流产、新生仔猪发生神经症状大批死亡。为了全面了解河南地区猪伪狂犬病的流行情况，本研究从血清学、病原学以及分子流行病学等方面对该病在我省的流行情况进行了调查分析，并为部分猪场制定了合适的PR防控方案。
　　用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2014年1月～2014年12月间河南省不同地区399个猪场的5325份送检血清样品进行PRV gE抗体检测，结果显示:399个猪场中有316个为PRV野毒阳性场，总阳性率为79.19％;其中豫东、豫西、豫南、豫北、豫中五个地区的猪场阳性率分别为70.59％、73.47％、68.49％、90.91％、77.11％;小规模、中等规模和大规模猪场的阳性率分别为80.79％、77.78％和76.25％;5325份血清样品的总阳性率为58.23％，其中母猪、公猪、后备猪和商品猪的血清样品阳性率分别为65.17％、58.57％、47.90％、32.19％;结果表明:河南省PRV野毒感染猪场较多，尤其是豫北地区;各年龄段的猪群PRV野毒感染情况均较严重，尤其是母猪群。采用PCR方法对2014年1月～2014年12月间河南省107个疑似发病猪场送检的280份组织病料进行PRV病原检测，结果显示:280份样品中有137份样品为PRV野毒病原阳性，总检出率为48.92％;其中豫东、豫西、豫南、豫北和豫中五个地区猪场检出率分别为76.19％、74.07％、75.00％、78.26％和62.50％，样品检出率分别为40.82％、44.26％、52.63％、59.38％和44.19％;结果表明:河南省已有较多猪场受到PRV野毒的威胁。
　　选取4份PRV野毒病原检测为阳性的病料，进行了gE全基因的扩增、克隆和遗传进化分析，结果显示:4个克隆子之间gE基因的核苷酸和氨基酸同源性分别为99.3％～99.7％和98.3％～99.3％;且4个克隆子与亚洲群毒株gE基因同源性较高，但存在部分位点的基因突变;它们与河南分离株QXX、QXY、JY、xccg的氨基酸同源性为97.2％～100％，其中H-NY与2013年河南分离株JY的氨基酸同源性为100％;与国内分离株BJ/RD、HB/HD、Guizhou-DY、LA、SC的氨基酸同源性为97.4％～99.7％;与韩国分离株Yangsan和马来西亚分离株P-PrV的氨基酸同源性在98.1％～99.3％之间;与美国分离株Becker和德国分离株Kaplan的氨基酸同源性在95.1％～96.0％之间。结果表明:河南省当前流行PRV野毒的gE基因与国内流行毒株亲缘性较近，且gE基因序列相对保守，提示当前的疫苗应能有效抵御当前流行毒株的攻击。
　　选取河南省不同地区的五个PR野毒感染阳性规模化猪，为其制定并实施了一年的综合防控措施，结果显示:一年后五个场的PRV野毒阳性率均大大降低，公猪、15周龄育肥猪、后备猪PRVgE抗体均为阴性;阳性母猪被阴性后备母猪替代，其PRV gE抗体阳性率降低;母猪生产性能得到提高。结果表明:综合措施的实施是有效的，可以使阳性猪场达到稳定的生产成绩。

目录

声明

致谢

摘要

文献综述

1 猪伪狂犬病概述

2 病原学研究进展

2．1 分类地位

2．2 病毒的基本特征

2．3 病毒分子生物学特征

2．4 病毒感染机制

3 流行病学研究进展

3．1 PR国外流行动态

3．2 PR在我国的流行特点

4 PR诊断方法

4．1 病原检测

4．2 血清学检测

5 PR的疫苗及防控现状

5．1 经典毒株疫苗

5．2 基因缺失疫苗

5．3 流行毒株疫苗研究

5．4 目前防控面临的困境

6 伪狂犬根除计划的研究

6．1 美国对PR的净化措施

6．2 荷兰对PR的净化

6．3 国内对PR的净化

试验一 河南省部分地区猪场PR流行情况研究

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

2 结果

2．1 猪伪狂犬病临床发病情况

2．2 河南省部分地区2014年猪场PRV gE抗体分析

2．3 河南省不同地区疑似发病猪场PRV野毒病原监测结果

2．4 河南省不同地区疑似发病猪场PRV的感染情况分析

3 讨论

3．1 河南省猪群感染PRV野毒情况极为严重

3．2 河南省不同地区PRV野毒阳性猪场比例差异加大

3．3 不同规模猪场PRV野毒感染阳性率均较高，但小规模猪场阳性率最高

3．4 不同阶段猪群PRV野毒感染阳性率不同，母猪PRV野毒阳性率最高

3．5 河南省不同地区疑似发病猪场PRV野毒抗原检出率高

3．6 针对当前河南省PR流行情况，务必采取综合措施来控制和净化

试验二 河南省部分地区猪场PRV野毒株gE基因进化分析

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

2 结果

2．1 gE基因克隆

2．2 氨基酸序列分析

2．3 gE基因的核苷酸及氨基酸同源性分析

2．4 gE基因的遗传进化分析

3 讨论

3．1 PRV gE全基因的克隆

3．2 PRV野毒gE基因进化分析

试验三 PR综合防控措施的制定及应用

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

2 结果

2．1 防控前后PR野毒抗原阳性率变化

2．2 防控前后各个阶段猪群gE野毒抗体阳性率变化

2．3 母猪生产性能指标对比变化

3 讨论

3．1 综合防控方案的实施取得了显著效果

3．2 PR防控净化任重道远，务必采取综合措施

全文小结

参考文献