昆虫抗菌筛选方法与美洲大蠊次生代谢物抗菌活性研究

摘要

近年来，随着致病菌的不断变异和耐药性的增强，加强和拓展具有重要抗菌活性的天然产物的研究，寻找一种有效的抗菌抗病毒物质已成为迫在眉睫的问题。本研究的第一部分选取几种常见的昆虫害虫为实验材料，对空气污染菌（枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌）和临床致病菌（耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、鲍曼不动杆菌和阴沟肠杆菌）进行筛选，利用液体接种平板法对各种昆虫粗提物建立不同浓度下抑菌剂量组评价，为后续分离工作打下基础。
　　本研究的第二部分选取美洲大蠊（蜚蠊目、蜚蠊科，俗称蟑螂）为实验材料，抗菌活性评价体系选用上述四种空气污染菌和四种临床致病菌为受试菌种，在生物活性指导下对其次生代谢物进行提取分离研究，实验中主要以柱色谱、薄层色谱为主要分离方法，结合 RP-HPLC等方法，研究70％甲醇浸膏获取的次生代谢物的抗菌活性，寻找新骨架抗菌化合物。
　　试验发现美洲大蠊70%甲醇提取物具有抑菌活性，分离纯化获得3个化合物。生物活性试验用盐酸青霉素钠作为阳性对照，两个化合物显示对枯草芽孢杆菌(ATCC strain6633)有抑制作用。均具有最小抑菌浓度值(MIC)10 mg·mL-1和抑菌圈直径(MIZ)φ=6.0mm。所得的3个化合物中，其中2个是异黄酮化合物，其中有一个异黄酮为新化合物，另一个为甾醇类化合物，它们均为首次从美洲大蠊中分离得到。
　　基于美洲大蠊药用价值的物质基础，本实验对其次生代谢物和抗菌活性进行初步探索，为寻找新结构的抗菌化合物提供新的昆虫资源，进一步为昆虫分类学和生态学提供依据。

目录

第1章 前言

1.1研究概述

1.2美洲大蠊研究进展

1.3昆虫次生代谢物研究进展

1.4昆虫抗菌活性化合物研究概况

1.5实验研究内容及意义

第2章 常见昆虫抗菌活性评价

2.1实验仪器与材料

2.2实验方法

2.3结果及讨论

第3章 美洲大蠊抗菌化合物研究

3.1实验仪器与材料

3.2实验流程

3.3昆虫粗提物制备以及抗菌评价

3.4美洲大蠊70%甲醇部位分离纯化

3.5化合物的结构鉴定

第4章 实验结果与讨论

4.1美洲大蠊粗提物抗菌实验结果

4.2美洲大蠊抗菌化合物分离结果

第5章 结论

缩略词汇表

附录 核磁谱图

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间的研究成果