射干麻黄汤对慢性哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响

摘要

目的：观察射干麻黄汤对哮喘小鼠PPAR-γ、DC及TGF-β1表达的影响，探讨其在气道炎症和气道重塑两方面治疗哮喘的作用机制，为临床应用提供实验依据。 方法：健康清洁级雌性BALB/c小鼠60只，随机分组，每组10只。分组如下：A组（正常对照组），B组（哮喘模型组），C组（地塞米松组），D组（低剂量中药组），E组（中剂量中药组），F组（高剂量中药组）。B、C、D、E、F组建立慢性哮喘模型。D、E、F组小鼠予不同剂量的射干麻黄汤灌胃；C组予地塞米松腹腔注射。取材后，对各组小鼠采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测BALF中TGF-β1的含量；半定量评定支气管周围炎症细胞浸润程度、杯状细胞比例；图像分析测量血管管壁厚度、气管平滑肌层厚度、气道旁和血管旁胶原纤维含量；透射电镜观察DC形态；免疫组化染色检测肺组织DC、TGF-β1及PPAR-γ表达情况；RT-PCR技术检测肺组织PPAR-γmRNA的表达水平；Western blot技术检测肺组织PPAR-γ在核蛋白中表达强度；实时定量PCR技术检测肺组织TGF-β1mRNA表达水平。 结果：1、与正常组比较，模型组炎症细胞浸润程度明显加重，肺组织杯状细胞评分及BALF中的白细胞总数、EOS、淋巴细胞等均明显增高，均有显著性差异(P＜0.05)；低、中、高剂量射干麻黄汤组较模型组炎症细胞浸润程度、肺组织杯状细胞评分及BALF中的白细胞总数、EOS、淋巴细胞均降低，有显著性差异(P＜0.05)；中、高剂量组与地塞米松组效果相近，无显著性差异(P＞0.05)；中、高剂量组效果相近，无显著性差异(P＞0.05)。 2、与正常组比较，模型组哮喘发作程度明显加重，肺组织血管管壁厚度、气管平滑肌层厚度、气道旁和血管旁胶原纤维含量明显增加，均有显著性差异(P＜0.05)；中、高剂量组较模型组哮喘发作程度减轻，肺组织血管管壁厚度、气管平滑肌层厚度、气道旁和血管旁胶原纤维含量均明显降低，有显著性差异(P＜0.05)；中、高剂量组与地塞米松组比较，无显著性差异(P＞0.05)；中、高剂量组效果相近，无显著性差异(P＞0.05)。 3、与正常组比较，模型组DC数量明显增加，有显著性差异(P＜0.05)；低、中、高剂量射干麻黄汤组较模型组DC数量降低，有显著性差异(P＜0.05)；中、高剂量与地塞米松组效果相近，无显著性差异(P＞0.05)；中、高剂量组效果相近，无显著性差异(P＞0.05)。电镜下，A组和B组小鼠肺组织DC呈典型表现，C、D、E、F组小鼠DC呈不典型表现。 4、与正常组比较，模型组肺组织PPAR-γ数量、PPAR-γmRNA及PPAR-γ在核蛋白中表达均明显增加，有显著性差异(P＜0.05)；地塞米松组较模型组PPAR-γ数量、PPAR-γmRNA及PPAR-γ在核蛋白中表达明显减少，而中、高剂量射干麻黄汤组PPAR-γ数量、PPAR-γmRNA及PPAR-γ在核蛋白中表达明显增强，均有显著性差异(P＜0.05)；中、高剂量组效果相近，无显著性差异(P＞0.05)。 5、与正常组比较，模型组BALF中TGF-β1含量、肺组织TGF-β1数量、TGF-β1mRNA表达强度明显增加，有显著性差异(P＜0.05)；低、中、高剂量射干麻黄汤BALF中TGF-β1含量、肺组织TGF-β1数量及TGF-β1mRNA表达较模型组均明显降低，有显著性差异(P＜0.05)；中、高剂量组较地塞米松组效果相当，无显著性差异(P＞0.05)；中、高剂量组效果相近，无显著性差异(P＞0.05)。 结论：1.射干麻黄汤可降低哮喘小鼠肺组织DC数量。2.射干麻黄汤可降低哮喘小鼠BALF中TGF-β1含量、肺组织TGF-β1数量及TGF-β1mRNA表达强度。3.射干麻黄汤可增加哮喘小鼠肺组织PPAR-γ数量，增强PPAR-γmRNA表达及PPAR-γ在核蛋白中的表达强度。4.射干麻黄汤可通过影响DC、TGF-β1及PPAR-γ表达情况，抑制哮喘气道炎症和重塑，从而达到治疗哮喘的目的。

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