大黄黄连泻心汤、理中丸（汤）对水浸应激型胃溃疡寒热证模型大鼠影响的研究

摘要

目的:建立水浸应激型胃溃疡寒、热证动物模型，探究其证侯变化规律，阐明寒热方剂（大黄黄连泻心汤、理中丸）的作用机制及方证相应规律，为进一步广泛和深入开展应激性胃溃疡寒、热证发病机制的研究和预防手段的筛选提供实验依据。 方法:采用寒因素（冰水、0.3mol/L氢氧化钠）及热因素（8％辣椒粉、60％乙醇）建立胃寒、胃热证模型，结合国内外较为公认的束缚水浸应激法创建应激型溃疡寒、热证结合模型，寒性方剂大黄黄连泻心汤、热性方剂理中丸（汤）灌胃治疗。1、束缚水浸应激7h后处死各模型及给药组大鼠，采用ELISA法测定各模型及给药组大鼠血清中血管内皮生长因子(VEGF)、血栓素B2(TXB))、血小板活化因子(PAF)、神经降压素(NT)、皮质醇(COR)、环磷酸腺苷(cAMP)含量;2、胃组织匀浆检测碱性成纤维细胞因子(bFGF)、前列腺素E2(PGE2)含量;3、脑组织匀浆检测乙酰胆碱酯酶(AchE)含量;4、免疫组织化学法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达。 结果:1、在COR、TXB2、bFGF方面，寒水、热水与空白组比较，均有不同程度的升高（P＜0.01或P＜0.05）;寒因素结合水浸应激型胃溃疡给予理中丸治疗组（以下简称寒水理）与寒水、热因素结合水浸应激型胃溃疡给予大黄黄连泻心汤治疗组（以下简称热水大）与热水比较，TXB2含量均明显降低(P＜0.01)，bFGF含量明显升高(P＜0.05)，热水大与热水比较，COR含量明显降低(P＜0.01)。2、在AchE、NT方面，寒水、热水与空白组比较，均有不同程度的降低（P＜0.01或P＜0.05），寒水理与寒水、热水大与热水比较，含量均明显升高（P＜0.01或P＜0.05）。3、在cAMP方面，寒水与空白组比较，含量降低（P＜0.01或P＜0.05），热水与空白组比较，含量升高;寒水理与寒水比较，含量升高;热水大与热水比较，含量降低。4、在PGE2方面，寒水组与空白、热水组比较，降低明显(P＜0.01或P＜0.05);寒水理与寒水、热水大与热水比较，含量明显升高(P＜0.01)。5、在VEGF、PAF方面，热水与空白、寒水组比较，含量升高(P＜0.01或P＜0.05);热水大与热水比较，VEGF含量升高，PAF含量降低(P＜0.05或P＜0.01)。6、在Bcl-2、Bax方面，寒水、热水与空白组比较，Bcl-2、Bax阳性细胞染色灰度值均有不同程度的降低;寒水理与寒水、热水大与热水比较，Bcl-2阳性表达上调，Bax表达下调。 结论: 1、水浸应激型溃疡热证与碱性成纤维细胞因子(bFGF)、血栓素B2(TXB2)、皮质醇(COR)、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板活化因子(PAF)、环腺苷酸(cAMP)含量升高有关;与前列腺素E2(PGE2)、神经降压素(NT)含量降低有关;与Bax表达上调有关。 2、水浸应激型溃疡寒证与碱性成纤维细胞因子(bFGF)、血栓素B2(TXB2)含量升高有关;与前列腺素E2(PGE2)、神经降压素(NT)、环腺苷酸(cAMP)含量降低有关;与Bax表达上调有关。 3、寒性方剂大黄黄连泻心汤预防水浸应激型溃疡热证的作用机制可能与提高VEGF、PGE2、NT含量、降低炎症介质PAF的含量、刺激胃黏膜bFGF释放、升高AchE含量、减少TXB2含量、抑制肾上腺皮质机能活动而减少COR含量、Bcl-2上调和Bax下调对抗应激条件下凋亡的发生和发展有关。 4、热性方剂理中丸预防水浸应激型溃疡寒证的作用机制可能与提高cAMP含量、降低TXB2含量、刺激胃黏膜bFGF释放、升高神经递质水解酶AchE含量、升高PGE2、NT含量、降低机体应激时细胞凋亡有关。

目录

声明

缩略语表

摘要

引言

文献研究

一、消化性溃疡病的沿革

二、现代医学对胃溃疡的认识

(一)胃溃疡的病因及发病机制

(二)胃溃疡的影响因素

三、应激性胃溃疡的研究现状

(一)应激性胃溃疡的病因及发病机制研究进展

(二)应激性胃溃疡的特征及治疗概况

四、中医对胃溃疡及应激性胃溃疡发病机制的认识与治疗

(一)对胃溃疡发病机制的认识与治疗

(二)对应激性胃溃疡发病机制的认识与治疗

五、病证结合的理论研究

(一)病证结合论治模式的创立与发展

(二)病证结合动物模型研究概况

(三)胃溃疡病证(寒、热证)模型的研究

六、方证相应的研究概况

(一)方证相应的概念和内涵

(二)方证相应的研究现状

(三)由“方剂辨证”谈方证相应

七、大黄黄连泻心汤、理中丸(汤)述要

(一)大黄黄连泻心汤

(二)理中丸(汤)

实验研究

一、实验目的

二、实验材料

(一)实验动物

(二)实验药物

(三)实验仪器及试剂

三、实验方法

(一)造模方法

(二)分组及给药方法

(三)取材方法

(四)指标检测方法

四、统计方法

(一)各模型及给药组大鼠血清VEGF、胃组织bFGF的变化情况

(二)各模型及给药组大鼠胃组织PGE2、脑组织AchE的变化情况

(三)各模型及给药组大鼠血清TXB2、PAF的变化情况

(四)各模型及给药组大鼠血清NT、COR的变化情况

(五)各模型及给药组大鼠血清cAMP的变化情况

(六)各模型及给药组大鼠胃黏膜免疫组化检测Bcl-2、Bax阳性细胞染色灰度值的变化情况

讨论

一、中医病证动物模型的现状及思考

二、“以方测证”方法的运用

三、应激性溃疡模型及寒热因素的选择

(一)热因素的选择及热模型的建立

(二)寒因素的选择及寒模型的建立

四、实验结果讨论

(一)水浸应激型胃溃疡寒、热证模型对VEGF的影响及方药佐证性研究

(二)水浸应激型胃溃疡寒、热证模型对bFGF的影响及方药佐证性研究

(三)水浸应激型胃溃疡寒、热证模型对PGE2的影响及方药佐证性研究

(四)水浸应激型胃溃疡寒、热证模型对AchE的影响及方药佐证性研究

(五)水浸应激型胃溃疡寒、热证模型对TXB2的影响及方药佐证性研究

(六)水浸应激型胃溃疡寒、热证模型对PAF的影响及方药佐证性研究

(七)水浸应激型胃溃疡寒、热证模型对NT的影响及方药佐证性研究

(八)水浸应激型胃溃疡寒、热证模型对皮质醇的影响及方药佐证性研究

(九)水浸应激型胃溃疡寒、热证模型对cAMP的影响及方药佐证性研究

(十)水浸应激型胃溃疡寒、热证模型对胃黏膜上皮细胞凋亡Bcl-2、Bax的影响及方药佐证性研究

结论

致谢

参考文献

附图

个人简介