过氧亚硝基阴离子在糖尿病骨质疏松大鼠发病中的作用及滋阴补肾方药防治机制

摘要

该研究采用6月龄Sprague Dawley(SD)雌性大鼠复制DM模型,用双能X线骨密度(bone mineral density,BMD)仪测股骨、胫骨的BMD值,采用组织形态学及逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)技术观察骨组织形态及骨iNOS mRNA表达的变化,探讨DOP的发病机制及滋阴补肾方药防治机理与iNOS mRNA表达的内在联系.通过应用免疫组化法检测骨中和高糖溶液培养OB中的iNOS、ONOO<'->的含量变化,探讨iNOS、ONOO<'-1>在DOP发病机制中的作用.采用改良的淬灭流动反应方法,体外制备ONOO<'-1>,在体外培养的OB中加入不同浓度的ONOO<'-1>,用Hoechst33258和TUNEL法观察不同浓度ONOO<'-1>作用后,OB的凋亡状况和丹皮酚(paenol,Pae)的拮抗作用;同时应用流式细胞仪检测不同糖浓度的OB凋亡百分率,及糖浓度与OB内iNOS、ONOO<'-1>含量的相关性,探讨高糖引起OB凋亡与OB内iNOS、ONOO<'-1>含量的关系.以不同终浓度的ONOO<'-1>加入OB培养体系中,用MTT法和酶动力学法观察在不同时相对OB增殖与分化的影响,并用不同终浓度的Pae消除ONOO<'-1>(1000μmol/L)对OB增殖与分化的影响,探讨ONOO<'-1>对体外OB增殖与分化的影响及Pae对抗ONOO<'-1>的作用.旨在阐明ONOO<'-1>对OB功能的影响,为DOP的防治提供相关试验依据.

目录

英文缩写

前 言

第一部分糖尿病骨质疏松大鼠模型的建立及iNOSmRNA表达的研究

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

附图、表

第二部分糖尿病骨质疏松大鼠iNOS、NT的免疫组化研究

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

附图

第三部分高糖致成骨细胞凋亡与iNOS、ONOO-的关系

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

附图、附表

第四部分过氧亚硝基阴离子对成骨细胞增殖与分化的影响

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

附图、表

结论

综述一：过氧亚硝基阴离子研究新进展

综述二：糖尿病骨质蔬松研究新进展

综述三：一氧化氮在骨质蔬松症中的作用机制研究

医学与哲学

科普文章

致谢

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